奥贝胆酸有关物质分析方法学验证
1、研究背景：
奥贝胆酸为6-乙基鹅去氧胆酸化学名为6alpha;-乙基-3alpha;、7alpha;-二羟基-5beta;-单甾烷-24酸，是由intercept制药公司研发的半合成鹅去氧胆酸，用于治疗原发性胆汁性肝硬化和非酒精性脂肪性肝病。奥贝胆酸是人初级胆汁酸中鹅去氧胆汁酸的一种新型衍生物为法尼酯X受体（FXR）的天然配体。FXR是一种核激素受体，包含一个高度保守的脱氧核糖核酸结合域和一个羧基末端配体结合域。在肝脏、肾脏和肠道等参与胆红素代谢的细胞中大量表达，胆汁酸是其天然配体。通过活化法尼醇X受体，间接抑制细胞色素7A1（CYP7A1）的基因表达。由于CYP7A1是胆酸生物合成的限速酶，因此奥贝胆酸可以促进胆酸合成，用于治疗疾病。2015年，FDA授予奥贝胆酸突破性疗法认定。因此奥贝胆酸具有巨大的市场前景和经济价值，对其有关物质的方法学验证迫在眉睫。
近年来，研究人员对奥贝胆酸的研究做出了突出的贡献，四川大学华西药学院药物化学系邱玥衍对奥贝胆酸及其有关物质的合成方法进行优化；南京理工大学姚绎炎本文作者采用 N-溴代琥珀酰亚胺 ( N-bro-mobutanimide，NBS) 氧化后再进行酯化的方法制备中间体 3alpha;-羧基-7-氧代-5beta;-胆甾烷-24-酸甲酯，然后用叔丁基二甲基氯硅烷对环上的羟基和羰基进行保护，再用三聚乙醛作为乙醛前体和环上形成的不饱和键进行亲电加成，脱保护后得到 3alpha;-羟基-6-亚乙基-7-氧代-5beta;-胆烷-24-酸甲酯，再进行催化加氢，最后水解并还原得到产物奥贝胆酸。
然而，对奥贝胆酸有关物质Ⅰ的分析方法并未有具体方案，为有效检测奥贝胆酸片的有关物质Ⅰ，采用HPLC法对其进行检测。对奥贝胆酸片有关物质Ⅰ分析方法进行验证，从而确保奥贝胆酸片的有关物质Ⅰ分析方法准确性和有效性。
2、实验材料：
2.1样品：
奥贝胆酸对照品（批号：115-20160901，含量：98.5%）、杂质115h对照品、杂质115-R4对照品、杂质115b对照品、杂质115a对照品、杂质115a-D1对照品、杂质115g对照品、杂质115-D1对照品、杂质115-D2对照品、杂质115-D3对照品、杂质115a-D1对照品、奥贝胆酸供试品（来源均为博瑞生物医药（苏州）股份有限公司自制）
2.2试剂：
