胶原诱导的lewis大鼠关节炎模型的建立及PI3K抑制剂IPI145对大鼠足肿胀的影响
1大概内容
目的：建立胶原诱导的Lewis大鼠关节炎模型，评价IPI145对大鼠关节炎发生的抑制作用。研究内容及研究手段：1造模方法： Bovine Collagen Ⅱ（2mg/ml）与等量不完全佐剂（IFA）制备乳剂。大鼠分三点皮内注射乳剂，靠近尾根的背部两点各注射0.2ml，尾根部注射0.1ml，每只共注射0.5ml，第7日采用同样的方法，加强免疫一次。模型Ⅱ组，于距尾部基底2cm的位置皮下注射。第7日采用同样的方法，再次皮下注射乳剂0.1ml加强免疫一次，注射部位为尾部基底3cm处。正常组皮内注射生理盐水作为对照替代模型组乳剂，其他条件相同进行试验。2正常组不分组，剩余鼠第11天按足体积进行分组，分为模型组、抑制剂IPI145组。第12天开始给药，正常组与模型Ⅰ组给予溶媒，阳性药组给予抑制剂IPI145，一天一次给药，给药至第25天。末次给药后次日，测量足体积，进行大鼠炎症评分，炎症发生老鼠数分组统计。主要成果形式：大鼠足体积肿胀程度， 大鼠炎症症状评分，炎症发生率等数据，分析大鼠关节炎足肿胀的抑制剂IPI145药效，模型建立的效果。
2文献综述
RA是由多种因素引起的以多关节的慢性炎症为主要病症的自身免疫疾病。RA的病理变化以滑膜炎和骨破为主，滑膜炎长期作用，最终导致RA关节骨的破坏， 包括滑膜表面、关节软骨与软骨下骨等的侵蚀。目前其病因仍不清楚，但深入研究表明Ｔ细胞在类风湿关节炎的发病过程中发挥重要作用。
胶原诱导性关节炎模型由于其引起的免疫机制和关节病理与类风湿关节炎相似，被广泛地应用于RA机制研究及关节炎治疗药物的筛选。变构肽在自身免疫疾病中的免疫调节作用研究已有一定基础。Ⅱ型胶原(CⅡ)是涉及RA发病机制的重要的自身抗原。既往研究表明在炎症关节滑膜组织内,聚集有大量的激活T细胞和巨噬细胞,这些淋巴细胞表面表达高水平的免疫激活分子,辅助信号分子,并分泌大量的促炎症细胞因子。在这一细胞因子网络中,TNF2a和IL21beta;起核心作用。TNF2a和IL21beta;具有许多相似的生物学作用,如促进细胞因子分泌、表达粘附分子、诱导细胞增殖和产生基质金属蛋白酶等。二者在RA中的发生发展中具有重要作用,可作为判断RA疗效的指标。VEGF是血管内皮细胞分泌的促进血管形成的特异性因子,VEGF可特异性地与滑膜成纤维样细胞结合,促进滑膜细胞有丝分裂;同时VEGF与滑膜内血管内皮细胞结合,一方面促进血管的生成,另一方面强有力地使血管通透性增高,促进金属蛋白酶和间质胶原酶的分泌,直接参与关节软骨和骨的破坏,VEGF是RA进一步发展的重要因子。研究表明,TNF2alpha;、IL21beta;等炎性介质对淋巴细胞特别是T细胞有趋化激活作用,激活的T细胞表面表达CD40L,CD40L与RA滑膜纤维母细胞表面CD40结合后激活下游NK2kB基因,最后启动VEGF基因的表达,反过来VEGF能促进血管内皮细胞增殖和增加血管的通透性,促使血管内物质的渗出,刺激炎症的形成和发展,炎症的刺激又可使TNF2a、IL21beta;生成增高,从而形成恶性网络循环。因此,TNF2alpha;、IL21beta;和VEGF在早期滑膜炎以及血管新生和血管翳形成具有协同和相互促进作用。
本实验我们采用牛Ⅱ型胶原诱导大鼠关节炎模型，根据大鼠足体积肿胀程度，大鼠炎症症状评分，炎症发生率等数据评价Ⅱ型胶原所建立的大鼠关节炎模型效果，并评价药物IPI145药物的治疗效果。
3工作进度：
课题开展进度：2015.03.02-2015.04.10：查阅类风湿性关节炎文献资料，了解胶原诱导的大鼠关节炎形成原理，并完成开题报告及论文综述的攥写
