- 综述与拟研究的问题
药物毒性是影响临床用药安全的重要因素之一，也是导致药物研发中止、拒批、限用或撤市的最常见原因之一，它既是一个严重的公共安全问题，也是医药领域亟待解决的共性科学问题。顺铂（DDP）是目前临床上最常使用的非周期特异性抗肿瘤药物之一，其抗肿瘤疗效与给药剂量成正比，然而剂量的增加受到顺铂肾毒性的限制，且肾损伤的发生率和严重程度与给药剂量呈正相关1，因此肾毒性是顺铂主要的剂量限制毒性。肾毒性有多种表现形式，其中以急性肾损伤（AKI）最为严重和常见，临床发生率在20%-30%2(Miller, Tadagavadi, Ramesh, amp; Reeves, 2010)，主要毒性靶位是肾小管，以近曲小管为甚3，常表现为上皮细胞缺血缺氧、急性坏死等1。前人总结了参与顺铂介导的肾损伤的多种潜在机制，包括：细胞内顺铂的积累2, 4、谷胱甘肽硫转移酶介导的毒性代谢物的产生、由对顺铂具有更高敏感性的细胞器如线粒体介导的细胞死亡2、氧化应激、炎症反应、脂质过氧化5等。对机制的进一步认知有利于我们研究能够减轻顺铂肾损伤的新型治疗手段。
目前临床上常见的减轻顺铂肾损伤的策略包括：采用利尿剂或甘露醇进行水化和强制利尿，加速顺铂的排泄3；适量补充镁以减轻顺铂引起的低镁血症；补充谷胱甘肽以避免巯基的耗竭6等，而临床上直接干预肾损伤的有效药物较为匮乏。
近年来，随着针对疾病多靶点干预的研究思路被广泛接受，中国传统医药也受到更多关注，与此同时促进了网络药理学在中药复方中的应用。网络药理学这一概念是由英国药理学家Hopkins于2007年率先提出，该概念基于系统生物学和多向药理学等多学科理论，运用各种组学、高通量筛选、网络可视化和网络分析等多种技术，揭示“药物－基因－靶点－疾病”之间复杂的网络关系，从多维度视角理解疾病的分子基础，预测药物的药理学机制，并通过相应的实验来验证、评估药物的有效性、作用机制及不良反应，从而发现高效、低毒的药物7。
大柴胡汤是出自《伤寒杂病论》的名方，由柴胡、枳实、半夏、芍药、大黄、黄芩、生姜、大枣八味药组成，具有内泻热结、和解少阳的功效8。其在临床上已有广泛的运用，除了常见的一些消化道疾病，大柴胡汤对慢性肝炎、急性传染性肝炎、脂肪肝等肝病也有较好的治疗效果8。中医传统理论有“肝木肾水”、“从肝治肾”的生理关系，称肝为肾之子，子能令母实，亦能令母虚。结合现代医学理论，我们可以理解为肝脏通过神经-内分泌-免疫网络发挥调节作用，与其他脏器进行功能上的协调统一。有文献报道肝-肾轴可以介导器官间损伤，非酒精性脂肪肝与慢性肾病的发病机制间存在密切联系9。近年来临床上也有报道称使用调肝方剂加减治疗肾炎、慢性肾功能衰竭取得良好效果10，这为“从肝治肾”理论提供了佐证。
此外，有报道称大柴胡汤对恶性肿瘤有良好的干预作用，且能减少化疗药物带来的不良反应11, 12。文献指出大柴胡汤能够促进肿瘤坏死因子的产生，不仅可以对肿瘤进行拮抗，可以调节免疫应答，使抗炎细胞被激活，对细胞的分化与增殖产生促进作用8，结合前文所提及的顺铂肾毒性发生机制，我们猜想大柴胡汤对抗肿瘤药物产生的肾脏损伤有一定的保护效果。
综上，本课题旨在探究大柴胡汤对顺铂所致肾损伤的保护作用，并试图采用网络药理学的研究手段阐明其潜在作用机制，期望为临床用药提供增效减毒的新思路。
- 研究内容与方法
- 制备大柴胡汤并进行冷冻干燥处理（预计3月末完成27副汤药的冻干粉制备）
将经方中的八味药材按照柴胡24g、枳实9g、半夏12g、芍药9g、大黄6g、黄芩9g、生姜15g、大枣(4枚)8g的比例称取，共92g。加6倍水浸泡2小时，武火煮沸后再煮1.5小时，趁热过滤留滤液，同法次煎1小时，趁热过滤留滤液，两次滤液混合后旋蒸浓缩，-80℃条件下冷冻干燥得粉末储存备用。
- 开展动物实验进行体内外药效评价（预计4月中下旬完成）
取SD大鼠50只，分组如下：对照组（Control，n=10）;DDP模型组（DDP，n=10）；大柴胡汤高剂量组（HDCHD，n=10）；大柴胡汤中剂量组（MDCHD，n=10）；大柴胡汤低剂量组（LDCHD，n=10）。按照人体重为60kg,大鼠体重为200g换算，以人的临床使用量为参照，换算后的1倍，2倍和4倍作为大鼠给药的低、中、高剂量组。
给药剂量和途径如下：对照组腹腔注射CMC-Na；DDP模型组尾静脉注射顺铂5mg/kg；HDCHD组灌胃大柴胡汤40g/kg；MDCHD组灌胃大柴胡汤20g/kg；LDCHD组灌胃大柴胡汤10g/kg。给药周期15天，其中大柴胡汤预给药10天，第11天给予顺铂造肾损模型，大柴胡汤继续治疗性给药5天。期间进行常规生理状态监测：体重、进食量、双侧肾脏重量、肾脏系数。第16天采血，收集肾脏、肝脏、脾脏。
