一、研究的目的及意义
近年来国际上对海洋天然产物的研究日益深入,最为普遍的是对海绵的研究。海绵生物种类的多样性,代谢途径的独特性,生存环境的复杂性以及共生体的不确定性,决定了其次生代谢产物的丰富多样。在半个多世纪的广泛探索中,人们从种类繁多的海绵中发现了萜类、含氮化合物(生物碱、氨基酸、核苷类、神经酰胺、环肽等)、聚醚类、大环内酯、过氧化合物、多烯多炔以及甾体等一系列化合物[1]。这些化合物中,许多具有广谱或特异性的抗肿瘤、抗病毒、抗微生物以及抑制各种生物酶等生理活性,其中不少化合物具有临床应用前景。
棕色扁海绵Phakellia fusca属海绵属寻常纲(Demospongiae)软海绵目(Halichondrida)小轴海绵科(Axinellidae)海绵。根据文献报道，从该属海绵中已经获得了吡咯生物碱[2], 环肽[3],聚醚大环内酯[4]等化合物，这些化合物多具有良好的生物活性，本课题通过对棕色扁海绵进行提取、分离纯化、结构鉴定和活性测试，制备出具有良好生物活性的单体，寻求新的抗肿瘤化学结构和先导化合物，为药物研究提供高效低毒的新的抗肿瘤候选药物，更充分的揭示和利用海洋资源的生物和化学多样性。
二、研究方法和技术路线
棕色扁海绵化学成分的提取、分离、结构鉴定和活性测试
提取：将棕色扁海绵剪碎，用甲醇超声提取3次得浸膏，将浸膏用水分散，乙酸乙酯萃取并将萃取所得浸膏混悬于90%的甲醇溶液中，用石油醚萃取3次，浓缩萃取液得到石油醚部位浸膏；加水将混悬液的甲醇浓度调整至60%，用二氯甲烷萃取3次，浓缩萃取液得到二氯甲烷部位浸膏；余下的60%甲醇部分稀释后正丁醇萃取，将最初的水相用正丁醇萃取3次，二者合并浓缩得正丁醇部位浸膏。
分离：分别对二氯甲烷层和正丁醇层萃取物进行系统分离，采用硅胶柱色谱、中压柱色谱、sephadex LH-20柱色谱、ODS反相柱色谱、HPLC制备色谱法等方法进行分离纯化，制备单体化合物。
结构鉴定：主要是采用核磁共振谱、质谱、红外、紫外光谱等方法解析结构，对涉及立体结构确定的化合物可采用比旋光度、ECD计算等方法进行绝对构型确定。
活性测试：对所得化合物进行体外抗肿瘤活性测试，主要通过MTT法测定单体化合物对肿瘤细胞的生长抑制活性。
- 研究内容
主要研究以下几个方面:
