开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
[一、目的和意义]
何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根。《本草纲目》曰其“益血气，黑髭发”，药典以何首乌和制首乌记载。何首乌的功效有解毒，消痈，截疟，润肠通便;制首乌补肝肾,益精血，乌须发，强筋骨，化浊降脂,是滋补肝肾的常用中药。近年来，何首乌致肝损伤报道逐渐增多，引起了众多学者的高度关注。由于缺乏基础研究，目前何首乌中肝毒性成分及致肝毒机制均不明确。因此寻找何首乌的毒性成分，探索何首乌的致毒机制，是目前如何正确使用何首乌、避免不良反应发生亟待解决的问题。因此本研究拟初步了解何首乌致肝损伤的物质基础、明确何首乌中造成肝损伤的部位。
[二、研究内容及手段]
研究对象：何首乌不同极性部位，肝L02细胞、肝癌HepG2细胞。
拟解决的问题：本文首先通过考察何首乌中的各不同极性部位（乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、水）对正常肝细胞及肝癌细胞存活率的影响来研究何首乌中可能的毒性成分；然后分析各部位对L-02肝细胞及HepG2细胞“量-时-毒”的相关性,为寻找何首乌可能致肝损伤的部位及成分提供理论依据。
实验方法：
1 用75%乙醇冷浸提取何首乌；
2 分别用乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到四种不同极性部位：乙醇(E)、乙酸乙酯(EA)、正丁醇(B)、水(W)。将各不同极性部位冷冻干燥，然后用DMSO配制成母液；
3 将消化计数的单细胞悬液加入96 孔板中，设实验组、空白组、阴性对照组。细胞浓度为5 times; 104个/mL，每孔加入单细胞悬液100 mu;L。待细胞贴壁后（培养 4h 后），吸取旧培养基，然后分别向实验组加入含药培养液（浓度分别为 0mg/ml、20mg/ml、60mg/ml、100mg/ml、160mg/ml），200mu;l/孔；向阴性对照组和空白对照组加入新培养液 200mu;l/孔。将培养板放置CO2孵育箱中分别孵育12ｈ、24ｈ、36ｈ，每孔加入100 mu;L 的MTT 液，继续培养4 h 后弃去上清，加入DMSO 后震荡10 min，在酶标仪 570nm 波长处读取吸光度( A) ，计算抑制率。
