拟研究或解决的问题：
本课题拟考察麦冬皂苷结合蛋白抑制剂（Blebbistatin）能否有效抑制脂多糖诱导THP-1细胞中TF的活性与表达，为Blebbistatin抑制单核来源 TF 提供实验参考依据，为其改善凝血紊乱的机理阐述提供新的角度。
采用的研究手段：
（1）脂多糖诱导THP-1细胞中TF的活性与表达
THP-1细胞用10% 1640培养基培养，以1times;106 cells/mL的密度接种于96孔培养板（150 mu;L /孔），37 ℃、5% CO2培养24 h。吸取培养基，换成无血清1640培养基，平衡2 h。 实验分为三组：① 空白组：先加入90 mu;L的无血清1640培养基1 h，再加入10 mu;L1640培养基；② 模型组：先加入90 mu;L的无血清1640培养基1 h，再加入10 mu;L脂多糖（终浓度为500 ng/mL）孵育5 h，以刺激TF的表达；③ 给药组：先加入90 mu;L不同浓度药物（1.0，0.1，0.01 mu;M）作用1 h，再加入10 mu;L脂多糖（500 ng/mL），共同孵育5 h。
（2）改良的发色底物法测定TF活性
药物与脂多糖共孵育5 h后，将细胞板内培养基吸去，每孔加无血清1640培养液100 mu;L，－70℃ 过夜，室温反复冻融3次，使细胞裂解，将裂解液吹打均匀，吸取45mu;L接种于另一新的96 孔板中，37℃ 温育5 min，加入新配制的人凝血酶原复合物（PPSB）溶液（5 mu;L/孔），37℃ 温育15 min，再加入新配制的发色底物溶液50 mu;L，温育3 min，用酶标仪在405 nm测定吸光度。
（3）蛋白印迹法测定TF的表达
等量加入细胞裂解液后，提取THP-1细胞的蛋白，4℃ 裂解30 min。离心去上清液。用BCA蛋白试剂盒测定蛋白质的含量。之后剩余的裂解液按1/5的体积加入6times;上样缓冲液煮蛋白。再用10% SDS–PAGE分离样品蛋白并转移到PVDF膜，膜由3%牛血清白蛋白（BSA）封闭2 h 并且由初级抗体孵化。然后由山羊、兔、鼠的抗体结合辣根过氧化物酶作为次级抗体孵化1.5 h，免疫反应带由化学发光系统（Bio-Rad）检测。
（4）RT-PCR法测定TF mRNA的表达
