开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、选题依据
慢性粒细胞白血病(CML)是严重威胁人类健康的常见造血系统恶性肿瘤,发病率约占白血病的20%[1]。目前联合化疗是白血病治疗的重要措施,虽然人们对CML的化疗采取了各种综合治疗策略,但肿瘤耐药仍然使部分治疗以失败告终。肿瘤耐药问题已经成为CML治疗中关注的焦点[2]。因而有必要进一步寻找高效低毒的CML耐药抑制剂。
P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)是一种分子量为170KD的跨膜糖蛋白,由1280个氨基酸残基组成,具有12个跨膜区和2个细胞内ATP连接点。P-gp由多药耐药(multidrug resistance,MDR)基因编码,P-gp分布广泛,找肿瘤和血脑屏障等正常组织上都有表达。P-gp转运物质的分子量从250Da到1850Da不等。被P-gp转运的化合物一般都含有芳烃基,多数被P-gp高效转运的化合物是碱性或不带电的,所有被P-gp转运的物质的共同特点是多少都含有疏水成分,P-gp具有能量依赖性药泵功能,既能与药物结合,又能与ATP结合,ATP供能,使细胞内药物泵出细胞外,减低了细胞内的药物浓度使细胞产生耐药性。有资料报道,复发和难治的白血病其P-gP表达增加。
大黄素(emodin,1, 3, 8-trihydroxy-6-methylanthra-quinone)是大黄(Radix et Rhizoma Rhei)和何首乌(Polygonum multiflorum)的橙黄色长针状结晶提取物,具有广泛的药理作用,如利尿、保肝、利胆、抑菌、抗炎及对心脑血管的保护作用和对免疫系统的调节作用等。近年来,研究表明,大黄素不仅具有抗肿瘤活性而且还可以增强抗癌药药效,在许多国家被作为抗癌药来研究和使用。
二、实验目的
本课题通过慢性粒细胞白血病伊马替尼耐药株K562/G01细胞与大黄素孵育,拟建立一种灵敏可靠的高效液相(HPLC)分析方法来检测细胞裂解液中大黄素的含量,为确证大黄素是否能够抑制P-糖蛋白提供依据。
三,拟研究或解决的问题
1.熟悉药品建立分析方法的 一般流程。
2.对本方法进行详细的方法学研究。
