标题:基于中性粒细胞的抗原捕捉系统用于肿瘤术后的免疫治疗
1、[研究的主要目的和意义]
根据此前已经有的实验研究,我们的实验主要着重基于中性粒抗原捕捉系统的构建及表征,并验证巨噬细胞对于凋亡中性粒细胞的胞葬作用。通过利用一系列人体自有的生理过程和反应活动,将捕获的肿瘤抗原递呈给抗原递呈细胞(APC),最终激活机体自身的免疫系统的特异性免疫反应,达到对肿瘤细胞的免疫杀伤作用。
该研究的意义在于:我们力求解决肿瘤个性化免疫治疗的难题——即肿瘤的异质性导致每个病人的肿瘤抗原都存在差别,而单独针对每个病人的肿瘤抗原进行治疗实在费时费力,不是明智之举。我们的研究方法“就地取材”,直接利用脂质体颗粒原位吸附肿瘤抗原以激活免疫系统,增强免疫疗效,可以巧妙避开肿瘤抗原差异性的难题。
2、[文献综述]
目前,针对人恶性肿瘤自身抗原的鉴定和特征识别是一个十分活跃的领域,已经有超过2000种肿瘤抗原被鉴定出来。但是,现有的针对肿瘤抗原的免疫疗法效果却并不令人满意。以诸如(CTLA-4, PD-1/PD-L1, LAG-3)类的免疫检查点抑制剂为代表,该类免疫抑制剂常常与放射疗法联合使用,而即便是联合疗法,其结果反应率仍然很低。
近年来,有相关文献报道,利用PLGA修饰的抗原捕捉纳米粒(antigen-capturing nanoparticles AC-NPS)可以高效捕获肿瘤自身抗原并将其递呈给抗原递呈细胞,从而激活机体免疫系统。研究数据表明,AC-NPS可以提供肿瘤特异性蛋白质并显著改善alpha;PD-1(抗程序性细胞死亡)的疗效,与对照组相比,它产生了高达20%的治愈率。同时机理研究表明,在使用了AC-NPS之后,CD8 毒性T细胞大量扩增,且CD4 T细胞与CD8 T细胞的比率也有所增加,这表明机体的特异性免疫反应被激活。同时,我校张灿教授团队以自体中性粒细胞作为载体,荷载抗肿瘤药物紫杉醇脂质体,保持细胞原有生理功能,利用中性粒细胞对术后炎症因子的趋向性以及不存在生理屏障的问题和可以变形穿越血脑屏障的特点,静脉回输治疗原位脑胶质瘤术后模型小鼠,实现了高效的基于炎症因子自主引导的药物递送。在阅读了相关文献并综合考虑了自身课题的具体情况后,我们决定按照以下方式设计实验:以阳离子脂质体为载体,构建中性粒抗原捕捉系统,验证巨噬细胞对于凋亡中性粒细胞的胞葬作用,并进一步达到自身免疫系统对肿瘤细胞的杀伤作用。
3、[研究手段](***部分实验由于时间原因尚未具体操作,理论设想如下)
3.1脂质体的制备(薄膜分散法)
(1)试剂 原料:胆固醇、类磷脂、CHCl3、甲醇、纯水
