开题报告
- 研究目的
空气污染是全球人口死亡的第五风险因素，细颗粒物（PM2.5）是最有害健康的空气污染物，与过早死亡最为相关。我国是PM2.5空气污染主要国家之一。肺血管内皮是颗粒物（PM）进入血液循环，导致全身性疾病的最后一道屏障。临床及实验研究发现PM2.5可诱导肺内皮细胞屏障破坏及凋亡，抑制内皮细胞凋亡可抑制脓毒症诱发的急性肺损伤后期内皮屏障的进一步破坏。由此可见，抑制肺内皮细胞凋亡，在改善肺内皮屏障功能中起到重要的作用，是防治PM所致肺损伤及全身损伤的重要环节。中药麦冬具有抗炎、抗氧化、抗血栓、抗病毒等药理活性，是临床治疗肺损伤的有效药物。课题组前期研究发现，其活性成分鲁斯可皂苷元（RUS）可改善PM诱导的肺损伤及血管内皮通透性增加，且RUS可减轻野百合碱诱导的小鼠肺动脉高压中肺内皮细胞凋亡。基于以上背景，本课题拟考察RUS对PM诱导肺内皮细胞凋亡的药效作用，为进一步阐明RUS保护PM诱导的肺血管内皮屏障破坏的作用机制，以及RUS改善PM诱导的全身性疾病的关键作用环节提供实验参考依据。
- 拟研究或解决的问题
- 探究鲁斯可皂苷元（RUS）对大气颗粒物（PM）诱导内皮细胞凋亡的药效作用，为进一步阐明RUS保护PM诱导的肺血管内皮功能障碍的作用机制提供实验参考依据。
三、研究手段及内容
- 通过查阅文献和总结课题组前期实验情况，选择并优化实验方法；
- 体外实验：采用PM刺激人脐静脉内皮细胞（HUVECs），利用Hoechst 33342法考察RUS对HUVECs凋亡的改善作用；利用Western Blot方法考察细胞凋亡相关蛋白Bcl-2，Bax，cleaved caspase-3的表达。
- 成果形式
成果将以基础研究论文的形式呈现。
- 课题进度
第一阶段（2020. 3）：熟悉实验室规则，进行文献查阅整理，学习基本细胞实验操作及模型制备方法，准备开题报告；
第二阶段（2020. 4 - 2020. 5）：完成体外实验中HUVECs细胞凋亡相关指标测定实验；
第三阶段（2020. 5 - 2020. 6）：整理数据，撰写论文，进行毕业答辩。
- 文献综述
中药对大气颗粒物诱导细胞凋亡的作用及机制
摘要：绝大多数人都会接触到不同来源的颗粒物（particulate matter, PM）的复杂混合物。流行病学研究表明，呼吸和心血管疾病的死亡率和发病率的增加与高水平的空气污染颗粒物相关。机体内稳态依赖于细胞死亡和更新之间复杂的平衡，而暴露于PM可触发细胞程序性死亡并破坏这种平衡。现代研究普遍认为，PM诱导细胞凋亡的机制主要涉及调控凋亡相关基因的表达，阻滞细胞周期，以及调控炎症、氧化应激相关信号通路的传导。PM引起不良健康影响的具体作用机制尚不十分明确，揭示PM暴露与细胞凋亡相关的具体机制一直是一个挑战，且如何预防和治疗PM诱导的相关疾病尤为重要。因此，本文综述了空气中PM暴露对细胞凋亡的相关机制，以及中药在其中发挥的作用和机制。
关键词：中药；大气颗粒物；细胞凋亡
