开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、课题背景
非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是世界上最常见的慢性肝病，影响高达30％的成年人和70-80％的肥胖和糖尿病患者。NAFLD包括从简单的脂肪变性到非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的组织学谱，后者可具有不同程度的纤维化。NASH可以进展为肝硬化和终末期肝病，是美国成人等待肝移植的第二大肝病病因。此外，NASH是2型糖尿病、心血管疾病和终末期肾病的危险因素。但是目前没有用于治疗NASH的药物被批准上市，迫切需要开发有效的治疗策略。
NASH的发病机制目前仍存在争议，在传统的“二次打击”假说中，肝脏脂肪变性是第一次“打击”，并且它增强了肝脏对随后的第二次打击的易感性，这是导致肝损伤，炎症和纤维化的原因。而 “多重平行打击”假设认为不同的致病事件并行发生促进肝损伤，因此，导致NASH发展的所有事件都是潜在的治疗靶点，包括胰岛素抵抗、脂毒性、氧化应激、内质网（ER）应激、线粒体功能障碍、脂肪组织功能障碍、细胞因子分泌和肠肝轴等等。
目前NASH研究的重点领域包括核转录因子的调节、靶向脂毒性和氧化应激、调节细胞能量稳态、代谢和炎症反应、改善炎症和纤维化。其中核转录因子的调节包括法尼醇X受体（FXR）激活剂、孕烷X受体（PXR）激活剂、过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）激活剂；针对脂毒性包括SREBP2介导的胆固醇积累、酸性鞘磷脂酶 - 神经酰胺系统、DAG O-酰基转移酶2-DAG系统；针对氧化应激包括核因子红细胞-2相关因子2（NRF2）激活剂、天然抗氧化剂如白藜芦醇和槲皮素；针对能量稳态和细胞代谢包括FGF21、AMPK激活剂、mTOR抑制剂；针对炎症包括抑制炎性体激活、拮抗趋化因子；针对纤维化包括半乳糖凝集素3抑制剂、赖氨酰氧化酶样蛋白2的抑制剂、5-脂氧合酶抑制剂、半胱天冬酶抑制剂、hedgehog信号通路抑制剂等。
细胞凋亡信号调节激酶（ASK1/MAP3K）是治疗NASH的新靶点。ASK1是有丝分裂原激活的蛋白激酶家族成员，介导MAPK信号通路激活。可以通过诱导构象变化或翻译后修饰，例如磷酸化、泛素化和去泛素化来调节ASK1激酶的活性，ASK1通过其羧基末端卷曲螺旋（CCC）结构域形成高分子量复合物(即使在未接受刺激的条件下也是如此)；硫氧还蛋白（Trx）结合位点位于氨基末端卷曲螺旋（NCC）结构域附近并使ASK1保持无活性。在应激条件包括氧化应激、内质网应激和钙流入等状态下，Trx从ASK1解离并募集TNF受体相关因子（TRAF）诱导ASK1的同源寡聚化，导致Thr838自身磷酸化激活从而激活其下游MAP2K，进一步激活Jun-N端激酶（JNK）和p38有丝分裂激活蛋白激酶，导致细胞凋亡等相关细胞效应。丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶5（PP5）可以使ASK1去磷酸化，导致其失活。ASK1激活及其信号通路在神经退行性疾病、心血管疾病、炎症、自身免疫和代谢性疾病等过程中起着重要作用。
图1. NASH中ASK1调节机制
ASK1抑制在临床前研究中显示出极小的不良反应，例如ASK1敲除小鼠没有表现出明显的表型变化或自发性肝功能障碍，这使其成为NASH治疗中引人注意的靶标。因此，在过去的十年中开发了新的ASK1抑制剂，其中一些正在临床试验评估中，Selonsertib（也称为GS-4997）是一种口服生物可利用的ATP竞争性ASK1抑制剂，这个药物的激酶活性IC50在3 nM左右，细胞EC50为2 nM。在小鼠PK实验中，GS-4997的血浆清除率为0.09 L/hr/kg，口服生物利用度75%，半衰期5.07 hr，表观分布容积（Vss）为0.55 L/kg。这个药物的两个三期临床试验(STELLAR III、IV)和联合用药二期临床，目前正在进行之中。其中在STELLAR IV三期临床试验中，GS-4997作为单药治疗症状较重NASH患者、初步的阴性结果已经公布。另外在症状较轻患者中的STELLAR III三期临床试验、以及联合用药的二期临床试验仍在进行之中。
目前已有文献及专利报道GS-4997的合成路线，总结如下：
- GS-4997合成路线I
