开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
乳酸菌（lactic acid bacteria，LAB）是一类能利用可发酵碳水化合物产生大量乳酸的细菌的通称。这类细菌在自然界分布极为广泛，具有丰富的物种多样性。它们不仅是研究分类、生化、遗传、分子生物学和基因工程的理想材料，在理论上具有重要的学术价值，而且在工业、农牧业、食品和医药等与人类生活密切相关的重要领域应用价值也极高。
乳酸菌具有抑制致病菌生长繁殖,刺激宿主免疫功能的作用。在人和哺乳动物中 ,早已有应用乳酸菌活菌制剂提高机体抗病力 ,促进宿主健康的报道。近年来，乳酸菌在控制病原菌方面有卓越的表现正逐渐被人们所关注。据发现用于水环境中的乳酸菌能恢复水体环境，控制病原菌，提高动物对疾病的防御抵抗能力。国内外许多学者已从鱼的体内分离到乳酸菌 ,通过适当途径给予养殖动物,可以抑制体内病原菌的生长。用乳酸菌来替代抗生素防御和治疗水产养殖动物疾病已成为一种新的有效的生物控制手段(Smith et al., 1994; Kim et al., 2004; Holzbauer et al., 2006; Miller et al., 2018)。王福强等(2005)从牙鲆(Paralichthys olivaceus)肠道中分离出两株乳杆菌均能在牙鲆消化道内定植，且定植无种属特异性和能达到降低水中以及牙鲆消化道内弧菌数量和促进牙鲆的生长。
目前用于动物肠道内容物中乳酸菌分离的培养基不多，MRS培养基是分离培养乳酸菌最常用的一种培养基，目前动物肠道内容物中乳酸菌的分离均用MRS培养基。称取肠道内容放在灭菌的生理盐水中，连续进行倍比梯度稀释，分别涂布在MRS的固体培养基(含有碳酸钙)上 ，恒温培养48h左右观察结果。王慧艳等用 MRS培养基从荷斯坦泌乳牛粪便中分离获得瘤胃乳杆菌、乳酸乳球菌等18株乳酸菌。郭奇苑等用MRS培养基从犊牛的肠道黏膜和食糜分离得到31株革兰阳性 、无芽孢乳酸菌，通过耐消化道环境筛选得到乳酸菌。MRS培养基是动物肠道分离乳酸菌的首选培养基。MRS培养基既能分离出杆菌也能分离出球菌，分离的乳酸菌种类更多，更适合乳酸菌的生长，是分离动物肠道乳酸菌的最佳培养基 。
本研究的目的是从水环境及鱼肠道正常菌群中分离筛选乳酸菌，并验证其抑菌作用，作为进一步开发生态制剂的基础。
本研究的主要研究手段包含在菌种的分离，乳酸菌的鉴定及乳酸菌的抑菌试验三方面：
- 菌种分离
水体乳酸菌的分离：从水环境中采取水样及底泥，鱼肠道内容物。
将样品用无菌生理盐水逐级10-1～10-3浓度梯度, 分别吸取100mu;L稀释液涂布于含碳酸钙的MRS分离培养基上，37℃培养24～48h。挑取明显有碳酸钙形成白色圈的菌落, 进一步分离纯化，并进行菌种保藏。
- 乳酸菌的鉴定
菌落的形态观察 ： 经 24 h 的培养后 ,观察各个平板的菌落数量、菌落形态、菌落颜色、菌落大小。挑取各平板上的单个菌落 ,进行传代培养。
镜检 ：对纯化的菌株进行革兰染色 ,观察菌体。
