实验目的:
根据临床前研究指导原则的要求,研究丹参酮ⅡA对四动脉结扎致大鼠全脑缺血后造成损伤的保护作用,为进一步开发该药提供试验依据。
实验方法:
1.动物分组及给药
SPF级雄性SD大鼠,体重250-300g,随机分为7组,每组20只,分别为丹参酮ⅡA高剂量组(15.0mg/kg)、中剂量组(7.5mg/kg)、低剂量组(3.75 mg/kg)、氯吡格雷组(7.5mg/kg)、金纳多组(15.0mg/kg)。另设假手术组及缺血模型对照组(均给以等容积的0.5%CMC-Na)。
各组大鼠每天灌胃给药一次,连续给药5天,给药容积为0.5ml/100g,氯吡格雷组首次剂量为维持量的2倍。
2.大鼠四动脉结扎致全脑缺血模型的建立
第四次给药后1h,大鼠用3%水合三氯乙醛(300mg/kg)腹腔注射(i.p)麻醉,然后制作大鼠急性完全性脑缺血模型。于枕骨下作1cm左右切口,于正中分离两侧背阔肌及斜方肌,暴露第一颈椎左右两个横突孔,以1411高频小电刀插入横突孔烫闭双侧椎动脉。烫闭双侧椎动脉后24h最后一次给药,乙醚麻醉状态下切开颅顶皮肤,于矢状缝与冠状缝相交及颞骨与人字缝相交处分别埋植脑电极,并接于MP150多导生理记录仪,以用于在试验过程中记录大鼠的脑电图(EEG)。
将大鼠背位固定,分离双侧颈总动脉。于给药后1h大鼠清醒状态下用带硅胶管的小动脉夹夹闭双侧颈总动脉,可见大鼠意识和翻正反射消失,眼变白,竖毛,呼吸加快。15min后去除动脉夹,造成再灌注模型。
3.丹参酮ⅡA对四动脉结扎致全脑缺血大鼠脑血管通透性的影响
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