开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
研究背景：
1.阿霉素对MCF-7细胞的作用
1.1阿霉素的药理及药动学介绍
本研究课题所研究的药物为阿霉素，又名14-羟正定霉素。由放线菌属培养液中分离出的一抗菌素。其盐酸盐为橘红色针状晶体。本品仅可静脉给药,血浆蛋白结合率很低。进入人体内迅速分布于心、肾、肝、脾、肺组织中,但不能透过血脑屏障。主要在肝内代谢,经胆汁排泄,50%以原形药通过胆汁排出,5%～ 10%在6小时内从尿排出。阿霉素清除的曲线是多相的,其三相T1/2分别为0.5小时、3小时和40～ 50小时。 阿霉素为抗癌药,抗癌谱较正定霉素广,作用较强。可抑制DNA及RNA合成,对细胞周期各阶段都有用,为一细胞周期非特异性用药。对急性白血病、淋巴瘤、乳腺癌、肺癌及多种其他实体肿瘤均有效。用于治疗急、慢性淋巴细胞性白血病及实体性肿瘤。毒性较强,有骨髓抑制、胃肠道反应及心脏毒性等。
1.2阿霉素对MCF-7细胞的作用机制
阿霉素对肿瘤细胞产生广泛的生物化效应，是细胞周期非特异性药物，具有强烈的细胞毒性作用，目前仍是乳腺癌化疗首选药物之一，其作用机制主要是阿霉素分子嵌入DNA从而抑制核酸的合成，最终导致细胞死亡。据相关文献报道，ADR对人乳腺癌细胞(MCF-7/S)生长增殖具有抑制作用，呈剂量依赖性。经免疫细胞化学SP法及图像分析发现ADR具有促进MCF-7/S细胞内去磷酸化Rb蛋白量增加的作用，表面ADR诱导MCF-7/S细胞凋亡可能与其上调乳腺癌细胞内去磷酸化RB蛋白表达水平有关。细胞内增殖细胞核抗原（PCNA）的功能是直接参与DNA的合成与修复，它的表达水平高低可以反映细胞的DNA合成速度，是衡量细胞增值的一个重要指标。该文献中，对照组乳腺癌肿瘤细胞PCNA表达高于ADR组，两者之间差异有显著性，表明ADR可以降低乳腺癌肿瘤细胞内PCNA阳性表达，提示ADR可以降低乳腺癌肿瘤细胞的增殖与其下调PCNA表达水平有关。
2.p53与细胞凋亡的关系
细胞凋亡是受一系列基因控制的程序化细胞死亡方式, 它是通过外源性或内源性的凋亡信号, 激活细胞内编码的自杀程序而促发的。p53 基因是由 11 个外显子和 10个内含子构成, 定位于人类染色体 17p13.1, 全长约20 kb, 编码分子量为 53 kd 的核内磷酸化蛋白。其产物 p53 蛋白由 393 个氨基酸组成, 能与特异性 DNA序列结合并激活转录。正常的 p53 基因为野生型(wt p53), 在细胞正常生长过程中起着重要的调节作用, 明显抑制细胞的转化生长。一旦 p53 基因发生丢失或突变则称为突变型(mt p53), 诱发多种癌变。
细胞凋亡是一个全或无、不可逆的过程。在受到一定的 DNA 损伤刺激时, 细胞必然要在死亡与生存之间做出选择。在正常情况下, 弱的DNA损伤刺激会引起p53转录促细胞生存基因, 引起细胞周期停滞,从而促进细胞对损伤DNA进行修复; 而在强刺激下, 细胞则会促进p53转录促凋亡基因, 从而引起细胞凋亡, 移除损伤细胞, 保护机体。凋亡刺激能造成 p53 水平的增加。当刺激较弱时, 胞质中的p53迅速被细胞中的抑凋亡蛋白如Bcl-2、Bcl-xL、Mcl-1中和, 并不能高效发挥其促凋亡作用。核内 p53 转录出的促凋亡蛋白( 如PUMA)也不足以去除抑凋亡蛋白的抑制作用
