课题名称：黄葵胶囊及其活性成分对肾纤维化的保护作用研究
开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
1．拟研究或解决的问题
黄葵胶囊是纯中药单方制剂，经多年的临床试验证实，其具有抗血小板聚集、降血脂、清除氧自由基、促进免疫复合物清除及保护肾小管功能等作用。黄蜀葵花Abelmoschus manihot (L.)Medic.，中分离出20余种生物活性成分，包括黄酮类、多糖类、鞣酸类以及长链烃类等化合物。其中，主要化学成分是AM总黄酮。AM 制剂黄葵胶囊治疗慢性肾脏病（chronic kidney disease，CKD）的机制主要包括抑制免疫反应、减轻炎症反应、改善肾纤维化、保护肾小管上皮细胞等[1]。
由于黄葵胶囊达到治疗效果需要服用比较大的剂量，而且因为其是中药制剂，除了能产生治疗效果的活性成分外还有其他的不知效果的成分。所以黄葵胶囊的活性成分需要用特定方法进行筛选从而达到减少服用剂量以及排除可能产生毒性作用的部分来达到增强治疗作用减少不良反应即高效治疗的效果。
近年来，有关CKD进展机制和干预措施的研究已成为国内外肾病学界关注的热点。目前，国际上公认的延缓CKD进展的主要药物包括活性维生D。还有经典的血管紧张素转化酶抑制剂、血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂以及他汀类制剂等[2]。除此之外，国内学者的研究表明，中药制剂在治疗CKD方面也取得了一定的疗效，黄蜀葵花制剂黄葵胶囊就是其中之一[2]。本课题拟在前期研究基础上，采用单侧肾小管结扎的小鼠模型,探讨黄葵及其活性成分对肾纤维化的的保护作用的影响，为其临床应用提供药理依据。
2．采用的研究手段
本次实验采用小鼠的单侧输尿管结扎模型(UUO)。实验材料包括健康ICR雄性小鼠；黄葵胶囊；氯沙坦；生理盐水等。实验方法为选取清洁雄性小鼠50只左右，体重18~22g，饲养后随机分为假手术组，模型组，UUO 低剂量组，UUO 中剂量组，UUO 高剂量组以及阳性对照组。在术后第7天处死各组小鼠。对梗阻侧肾脏进行HE及Masson染色、免疫组织化学染色及逆转录聚合酶链式反应技术（RT- PCR）检测，观察小鼠肾间质的病理改变及TGF-beta;1，alpha;-SMA在肾组织的表达变化。
黄葵胶囊的活性成分包括黄酮等。采用细胞内蛋白印迹实验筛选黄葵胶囊的活性成分。首先在96孔板中培养NRK-49F细胞。加入前期实验室分离得到的黄葵单体化合物和TGF-beta;1共孵育24h，吸去培养基，经甲醛固定，Triton打孔后，5%奶粉封闭1h。封闭结束后，加入Collagen I抗体孵育过夜。清洗后，加入二抗。最后，进行荧光扫描定量。
3．文献综述
