一.研究目的
本课题以CHO-K1为宿主细胞通过GS系统快速构建能表达抗体的fast cell pool，并通过ELISA、SDS-PAGE、Western blot等实验方法对抗体的表达进行初步评估，为后期科研人员制备、纯化并研究抗体的性质提供了基础。
二、主要研究内容
1.通过GS系统构建表达抗体的fast cell pool;
2.抗体在fast cell pool中表达的评估
3.Fast cell pool细胞冻存和冻存质量的检测（复苏后检测细胞密度、细胞活率、支原体）
三.文献综述
近年来生物药物飞速发展并广泛涉及于各个领域，其中由哺乳动物细胞系表达的重组蛋白类产品更是占据了很大的比重。而如何快速地构建可以稳定高效表达重组蛋白的细胞系是蛋白类药物研发、生产过程中的核心问题之一，构建快速细胞池、普通细胞池与单克隆细胞是其重要的实现手段。通过将目的基因转染进宿主细胞，并筛选出可以稳定高表达的细胞是以上三种方法的共同理念，而区别在于构建快速细胞池相较于其他两种方法大大节省了时间与经济成本。
快速细胞池的构建一般只需要三到四周的时间，但其缺点在于最终成品的表达量低于普通细胞池与单克隆。所以对于工业生产更适于用略长的时间去构建普通细胞池或进一步筛选出产量更高的单克隆细胞，而构建快速细胞池更适合于为前期的研发与试验提供重组蛋白。
成功构建一个合格的细胞池需要考虑多方面因素，表达量、纯化产物的难易程度、冻存与复苏的质量是主要的衡量标准。其中，纯化产物的难易程度主要取决于宿主细胞的选择以及培养基的成分，应选择可以将目的蛋白分泌到细胞外且可以在成分清晰的无血清培养基中正常生长表达的宿主细胞，可以大大减轻后期目的产物的纯化步骤。宿主细胞的状态和性质很大程度上决定了重组蛋白的表达量，通过细胞工程对宿主细胞进行改造成为提高表达量的一种重要途径。在细胞生长过程中，培养环境中营养物质的消耗、细胞内代谢废物的积累等都构成影响细胞状态以及表达量的因素，所以调解细胞程序性凋亡、调节代谢途径、表达糖基化酶等方向成为被广泛研究的热点。
