开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、拟研究的问题
本课题拟通过人体肾脏的上皮细胞HEK-293T细胞瞬时转染,构建高表达PMCT基因的细胞模型,研究PMCT对柠檬酸的转运,探究黄芩苷对PMCT的抑制作用,为代谢性疾病的治疗提供新的思路。
二、研究手段
1.构建重组质粒 pCDNA3.1-PMCT;
2.利用HEK-293T细胞瞬时转染重组质粒 pCDNA3.1-PMCT,构建高表达PMCT基因的细胞模型;
3.利用LC-MS/MS,进行柠檬酸摄取试验,研究高表达PMCT基因的细胞对非放射性同位素标记的柠檬酸的转运功能;
4.利用LC-MS/MS,通过柠檬酸摄取实验,加入抑制剂黄芩苷,研究黄芩苷对PMCT的抑制作用。
三、文献综述
摘要:柠檬酸转运蛋白(PMCT)为新发现的钠离子偶联的羧酸转运蛋白家族的一员,主要功能是负责转运三羧酸循环的中间体,近年来研究发现PMCT可能是治疗糖尿病和肥胖症的重要药物靶点,该研究通过探究黄芩苷对PMCT的抑制作用,从而为代谢性疾病的治疗提供新的思路。
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