开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
- 课题的研究背景、意义和目的
近年来,随着癌症放疗、化疗和器官移植患者人数的不断增加,免疫抑制及艾滋病感染、空气恶化等使条件性致病真菌感染的发病率显著上升,真菌感染的机会非常之高。治疗过程中不断出现严重的真菌感染,特别是具有抗药性的菌株的出现,使得真菌治疗困难重重。由此在临床上急需开发出高效、低毒的广谱抗真菌药物。植物病原真菌感染也仍然是威胁农作物生长的重要因素。因此,我认为筛选出抗真菌的放线菌及进行初步鉴定是必要的,这也是我正在做的毕业设计课题。
放线菌是一类比其他微生物更为丰富的生物活性物质资源,历史上为抗生素工业的建立和发展发挥过巨大作用。放线菌广泛存在于不同的自然生态环境中,种类繁多、代谢功能各异;许多放线菌能产生生物活性物质,是一类具有广泛实际用途和巨大经济价值的微生物资源。医药工业的发展使人们认识到微生物多样性是发展健康保护和疾病控制新药的必须和潜在的重要因素。今天随着放线菌生物多样性研究的发展,放线菌仍然具有产生新的生物活性物质的极大潜力。在目前已经发现的数万种微生物来源的生物活性物质中,约有70%是由放线菌所合成的各种次生代谢产物。放线菌所产生的生物活性代谢产物中,抗生素最引人注目。放线菌中又以常见放线菌——链霉菌产生的抗生素种类最多,占总数的52%。放线菌也产生除抗生素外的其他多种生物活性物质,如酶及酶抑制剂有机酸、氨基酸、维生素、甾体、生物碱、免疫调节剂等。
因此,通过对放线菌产生的活性物质的研究,从而找到抗真菌的放线菌对我们来说至关重要,而又任重道远。本实验通过第一阶段的放线菌(链霉菌)培养、第二阶段的抑菌试验(筛选出可能产生抗真菌活性物质的放线菌)、第三阶段的鉴定试验(形态学鉴定、生理生化试验)来确定出至少一种的具有抗真菌的放线菌。从而以此为基础探究治疗由真菌引起的疾病,达到本课题的基础研究目的。
二、研究的主要内容
- 放线菌的培养
将放线菌接种到高氏1号斜面或在此之前接种到高氏1号平板进行纯化,后放到27℃的培养箱中进行培养。一段时间后,将已经长好的放线菌接种入放线菌发酵培养液中,再放入摇床中进行培养。
- 放线菌的筛选
进行管碟法试验,对发酵液中的放线菌进行抑菌试验,筛选出可能有抗真菌活性物质的放线菌。
- 放线菌的鉴定
为了深入了解筛选出的具有抗真菌活性的放线菌的性质,对该放线菌进行初步鉴定。鉴定方法主要为:形态学鉴定;生理生化试验等。
- 研究难点
- 放线菌培养时可能被污染而影响实验。
- 由于进行试验的放线菌的抗性未知,因此可能要筛选多次才能筛选出想要的放线菌,时间周期比较长。
- 进度安排
2015.3—2015.4 进行培养、筛选、鉴定试验。
2015.4—2015.5 对筛选出的放线菌进行纯化、培养、保藏。
