开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一.研究背景，目的及意义
仑伐替尼是多靶点酪氨酸激酶抑制剂，它有抗肿瘤的效果，目前用于不可切除的肝细胞癌、分化型甲状腺癌、肾细胞癌等患者的治疗。对于肝细胞癌的治疗，通常是索拉非尼作为一线药物被应用，但在2017年中国最权威的全国临床肿瘤大会上，有数据指出仑伐替尼在总生存期方面比索拉非尼大有提高，这无疑是对肝癌患者的新希望。可是在临床的试验和应用中，患者出现了对仑伐替尼耐药的情况，为了让患者获得更良好的治疗效果，找出仑伐替尼耐药的分子机制是至关重要的。耐药分子机制的研究不仅仅对仑伐替尼更好地应用于患者有益处，也使广大的肿瘤患者多一分治疗的希望。
二.拟研究的问题
1.如何构建相应的CRISPR文库
2.耐药细胞的筛选方法
3.相关耐药基因的获得与分析
三.研究思路及方法
1.完成CRISPR文库的扩增
1）细胞感染Cas9表达载体，筛选出稳定表达Cas9的细胞
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