拟研究和解决的问题:续断为川续断科植物川续断Dipsacus asperoides C.Y.Chenget T.M.Ai的干燥根,具有补肝肾、行血脉、续折伤的功用,临床上多用于腰膝酸软,风湿痹痛,崩漏,胎漏,跌打损伤等症。药物理化性质是药物发挥临床作用的基础,因此研究中药炮制前后理化性质的变化对探讨中药炮制作用和原理具有重要意义。本次实验是利用HPLC-ELSD检测技术来研究续断药材的指纹图谱,比较发汗与不发汗药材水溶性浸出物和药效成分含量相差是否悬殊,研究发汗工艺对续断药材水溶性浸出物和川续断皂苷VI含量的影响。
研究方法:HPLC采用Zorbax Eclipse XDB-C18柱(4.6times;250 mm, 5 mu;m),Ser. NO. USHR026272色谱柱;流动相为水-乙腈,梯度洗脱:0~5 min,5%~11.5%乙腈;5~15 min,11.5%~25%乙腈;15~25 min,25%~29%乙腈;25~30 min,29~33%乙腈;30~40 min,33~55%乙腈;柱温为30 ℃,流速为1.0mL/min;ELSD漂移管温度为5℃,载气流速1ml/min,增益2。
文献综述: 续断为川续断科植物川续断Dipsacus asper Wall exHenry 干燥根。味苦、辛,微温,归肝、肾经,具有补肝肾,行血脉,续折伤的功效,临床上多用于腰膝酸软、风湿痹痛、崩漏、胎漏、跌打损伤等症,产于四川、贵州、湖北、重庆和湖南等地。
有些药材在加工过程中用微火烘至半干或微煮、蒸后,堆置起来发热,使其内部水分往外溢,变软,变色,增加香味或减少刺激性,有利于干燥。这种方法习称“发汗”。
续断“发汗”后水溶性浸出物、水溶性浸出物和总皂苷都降低了,但“发汗”能使续断皂苷Ⅵ含量也有所升高。上述结果的原因可能是续断在以麻袋覆盖堆置“发汗”的过程中酶解了相关物质所致。“发汗”这一传统的产地加工方法具有一定的科学性建议产地加工“发汗”工艺应该得到坚持,但“发汗”机理还待进一步研究。受市场经济的影响,药农的加工趋于简单化,要么不发汗直接晒干或烘干,要么“发汗”的时间、温度达不到要求,导致商品续断品质下降,这种状况亟待改变。
高效液相色谱仪日益普及, 所分析的样品范围也越来越广。高效液相色谱以其灵敏、快捷、可分离大多数液体样品等优点, 已经广泛应用于中药的有效成分含量测定、组分分析、指纹图谱等方面, 高效液相色谱检测器中除了最常用的紫外检测器之外,还有荧光检测器, 示差折光检测器, 蒸发光散射检测器, 质谱检测器, 核磁共振检测器等。蒸发光散射检测器一定程度上弥补了HPLC 传统检测器的不足,特别是无紫外或紫外末端吸收的大分子有机化合物的检测, 显示出极大的优越性。其响应值不依赖于样品的光学性质, 不论它具有何种官能团。对所有样品的检测几乎具有相同的响应因子, 对未知物和纯度的测定要比UV 检测更容易更准确。随着蒸发光散射检测器技术的不断改进和完善, 将在中药分析领域广泛的应用。
中药指纹图谱的研究,,目前应用比较多的是HPLC-UV /DAD系统。它可以比较全面地反映中药所含内在化学成分的种类和数量, 但是, 中药是一个复杂作用体系, 是各种不同成分综合作用于人体的结果, 使用HPLC-UV /DAD系统, 并不能使弱紫外吸收成分和无紫外吸收成分在指纹图谱中有所体现。ELSD 是通用型检测器, 如果选择适当的色谱条件和仪器参数, 在确保其稳定性和精密度的前提下, 应用于中药指纹图谱的建立, 可以全面控制中药中的整体物质群, 真实反映中药内在的化学成分, 更符合于中药指纹图谱的要求。
3.文献来源
[ 1 ] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典(第一部) [M]. 北京: 化学工业出版社,2005: 231.
[ 2 ] 王初. 发汗与不发汗续断中水溶性浸出物和川续断皂苷Ⅵ的比较[J].中草药,2007,38( 6) : 865 - 866.
