开题报告内容：
- 研究背景
非酒精性脂肪肝病（NAFLD）是指除外酒精和其他明确的损肝因素所致的，以弥漫性肝细胞大泡性脂肪变为主要特征的临床病理综合征。传统医学并无此类病名，按其临床表现可将其归属于中医的“痰证”、“湿阻”、“胀满”、“积证”、“胁痛”范畴，发病机理与痰、湿、淤、积等相关，主要责之于肝、脾两脏。脂肪肝的治疗，目前尚缺乏较为理想的方法和药物。降脂西药虽然短期降脂效果明显，但长期服用，部分患者出现药物引发的肝功能损伤。因此，探寻安全有效的降脂护肝中药，对脂肪肝的防治具有重要的社会意义。
黄连解毒汤（HJD）由黄连、黄芩、黄柏、栀子等组成，源于唐朝王焘所著之《外台秘要》是中医清热解毒的经典方。孙健等在血清中检出 10 个来源于黄连解毒汤的原型成分，其中确定有栀子苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素[1]，实验室和临床研究证明，黄连解毒汤对人和动物酒精性脂肪肝有很好的预防和治疗作用[2,3]。以往的研究表明，黄连解毒汤的 4 味中药材中，黄连中的小檗碱和黄芩茎叶总黄酮有很好的降血脂作用。栀子中的栀子苷对胆固醇结石有一定的治疗作用。因此针对NAFLD的发病机理，HJD配伍成分中的药物可直接针对NAFLD的病因发挥作用。
- 设计方法及方案
（1）建立大鼠果糖模型，证实目标中药复方对果糖诱导的肝脏损伤及脂质堆积、高胰岛素血症、高瘦素血症和瘦素抵抗和肝脏胰岛素和瘦素抵抗的改善情况。
①造模
雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠（180-220 g）饲养在塑料笼中，每笼一只，室温保持22 plusmn; 2°C，室内相对温度保持在55 plusmn; 5%，每天12h照明（早上6:00开灯），动物自由摄水、摄食，适应环境1周后进行实验。去除体重异常的大鼠，模型组给予10%果糖水，饮食均正常，造模8周。新鲜饮用水每两天更换一次。果糖造模4周后，随机分为5组，每组15只，分别为：模型对照组（灌胃给予10%果糖水1 ml/kg）、HJD组和吡格列酮组（4mg/kg，阳性药），继续饲养4周。所有药物均在下午2:00-3:00完成，每天一次。另外，15只大鼠摄取正常水和饲料（灌胃给予蒸馏水1 ml/kg），饲养8周，作为空白对照组。大鼠体重及24小时摄食摄水量每周记录一次。第八周处死所有实验组大鼠。
②口服葡萄糖耐量实验（OGTT）和胰岛素糖耐量（ITT）实验
第八周进行GTT 和ITT 实验，血清葡萄糖水平采用试剂盒方法测定。
③尿液、血清和肝脏组织取样
第8周时，将大鼠置于代谢笼中过夜，收集24h尿液，3,000 times; g 离心5分钟取上清液，样品可贮存于-20 °C，用于尿液指标的测定。OGTT 和ITT 实验结束后，所有动物恢复3天，在断粮16小时后，于上午9:00-11:00集中处理，眼眶后静脉丛取血，3000times;g 4°C离心10min，取血清保存于-80°C备用。断颈处死大鼠，在冰台上迅速摘取肝脏组织并称重，一部分肝脏组织立即固定用于苏木素-曙红（HE）和油红O染色，剩余肝脏和肾脏组织液氮速冻，保存于-80°C用于PCR和western blot实验。
