- 本课题研究的目的
非酒精性脂肪肝病（NAFLD）是指除外酒精和其他明确的损肝因素所致的，以弥漫性肝细胞大泡性脂肪变为主要特征的临床病理综合征。传统医学并无此类病名，按其临床表现可将其归属于中医的“痰证”、“湿阻”、“胀满”、“积证”、“胁痛”范畴，发病机理与痰、湿、淤、积等相关，主要责之于肝、脾两脏。脂肪肝的治疗，目前尚缺乏较为理想的方法和药物。降脂西药虽然短期降脂效果明显，但长期服用，部分患者出现药物引发的肝功能损伤。因此，探寻安全有效的降脂护肝中药，对脂肪肝的防治具有重要的社会意义。黄连解毒汤（HJD）由黄连、黄芩、黄柏、栀子等组成，源于唐朝王焘所著之《外台秘要》是中医清热解毒的经典方。孙健等在血清中检出 10 个来源于黄连解毒汤的原型成分，其中确定有栀子苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素[1]，实验室和临床研究证明，黄连解毒汤对人和动物酒精性脂肪肝有很好的预防和治疗作用[2,3]。以往的研究表明，黄连解毒汤的 4 味中药材中，黄连中的小檗碱和黄芩茎叶总黄酮有很好的降血脂作用。栀子中的栀子苷对胆固醇结石有一定的治疗作用。因此针对NAFLD的发病机理，HJD配伍成分中的药物可直接针对NAFLD的病因发挥作用。
二、拟解决的关键科学问题
（1）明确TBK1-IKKε信号通路在果糖诱导的大鼠非酒精性脂肪肝中的介导作用，阐明果糖诱导的非酒精性脂肪肝中脂代谢紊乱和炎症形成的分子机制。
（2）进一步明确目标中药复方在果糖诱导的大鼠非酒精性脂肪肝中的护肝作用与抑制肝脏炎症因子通路相关。
（3）明确目标中药复方对TBK1-IKKε信号通路的影响，阐明目标中药复方防治非酒精脂肪肝的可能分子机制和作用靶点。
三、研究内容实施方案
（1）建立大鼠果糖模型，证实目标中药复方对果糖诱导的肝脏损伤及脂质堆积、高胰岛素血症、高瘦素血症和瘦素抵抗和肝脏胰岛素和瘦素抵抗的改善情况。
①造模
雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠（180-220 g）饲养在塑料笼中，每笼一只，室温保持22 plusmn; 2°C，室内相对温度保持在55 plusmn; 5%，每天12h照明（早上6:00开灯），动物自由摄水、摄食，适应环境1周后进行实验。去除体重异常的大鼠，模型组给予10%果糖水，饮食均正常，造模8周。新鲜饮用水每两天更换一次。果糖造模4周后，随机分为5组，每组15只，分别为：模型对照组（灌胃给予10%果糖水1 ml/kg）、HJD组和吡格列酮组（4mg/kg，阳性药），继续饲养4周。所有药物均在下午2:00-3:00完成，每天一次。另外，15只大鼠摄取正常水和饲料（灌胃给予蒸馏水1 ml/kg），饲养8周，作为空白对照组。大鼠体重及24小时摄食摄水量每周记录一次。第八周处死所有实验组大鼠。
②口服葡萄糖耐量实验（OGTT）和胰岛素糖耐量（ITT）实验
