开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一丶课题背景
草珊瑚，学名:Sarcandra glabra (Thunb.) Nakai，为金粟兰科多年生常绿亚灌木，俗称满山香、观音茶、九节花、接骨木等。其形态秀丽、四季馨香，具有极高的药用、食用及观赏价值。全株供药用，能清热解毒、祛风活血、消肿止痛、抗菌消炎。主治流行性感冒、流行性乙型脑炎、肺炎、阑尾炎、盆腔炎、跌打损伤、风湿关节痛、闭经、创口感染、菌痢等。还用以治疗胰腺癌、胃癌、直肠癌、肝癌、食管癌等恶性肿瘤，有缓解、缩小肿块、延长寿命、改善自觉症状等功效，无副作用。[1]茎横切面:表皮细胞1列，外被角质层。皮层外侧有2-3列厚角细胞，内侧为7-10列薄壁细胞，有少数油细胞和含鞣质细胞散在;石细胞单个或成群，多边形至类圆形，纹孔明显。韧皮部外侧纤维束呈新月形，壁厚，木化，每束纤维两侧常有1-4个切向延长的大形厚壁细胞;韧皮部狭窄;形成层不明显;木质部多为管胞，径向排列。初生射线宽4-5列细胞，次生射线宽1-2列细胞。髓大，有少数鞣质细胞散在，有时可见大形石细胞单个或成群存在;老茎髓部中心常中空。[2]叶横切面:表皮外被厚用质层，下表皮可见气孔。栅栏组织细胞1列，细胞短小，不通过主脉;海绵组织有少数油细胞散在。主脉向上方略隆起，向下方突出，上下表皮内侧有1-2列厚角细胞;维管束1-2个，外韧型，其内、外侧均有发达的纤维群，纤维壁厚，木化;石细胞不规则多角形，单个或成群分布于薄壁组织中。[2] 含挥发油、酯类、酚类、鞣质、黄酮、氰甙、香豆素、内酯等。全株含左旋类没药素甲，异秦皮定，延胡索酸，琥珀酸，黄酮甙及香豆精衍生物事。此外，还含 0.15%-0.20%的挥发油。
- 要解决的问题
已有的研究表明，草珊瑚的有效成分不是单一的某一种或某一类，因为以目前的研究方法与科学水平，要对其所有有效成分进行含量分析，还是有一定难度的。目前已知从草珊瑚中分离出的成分有30多种，包括半萜（苷）类。黄酮（苷）类，有机酸类，香豆素类以及其他类。[4]
通过比较分析草珊瑚中根、茎、叶挥发油类化学成分的差异,揭示草珊瑚不同部位药效差异,评价草珊瑚叶中倍半萜二聚体类化学成分及其抗炎活性。
从草珊瑚中提取分离得到结构新颖的倍半萜及倍半萜二聚体类成分，确定其平面结构和立体构型。对单体化合物进行抗炎活性，及其构效关系研究，并对活性好的化合物进行作用机制的研究。[6]
- 可行性分析
以LC为分离手段，集LC的高分分离能力与灵敏度、专属性于一体，现已成为药物杂质检查、活性成分提取与分离的重要工具。
对草珊瑚植物的不同部位进行了预试验：将500g新鲜草珊瑚植物的根、茎、叶分别用95%乙醇超声提取，得到的粗浸膏用水混悬后分别进行二氯甲烷萃取，通过HPLC-MS分析，基本确定了草珊瑚各部位中所含目标化合物所在部位，其中常见乌药烷型倍半萜二聚体在根中含量丰富；叶和茎中有相似成分，但叶中所含倍半萜类成分含量和类型更为丰富。针对草珊瑚不同部位及粗砍段进行抑制LPS诱导的小鼠RAW 264.7释放NO活性的筛选，确认了抗炎活性良好的目标部位。[3]
研究方法和内容
- 查阅文献，熟悉掌握草珊瑚叶中倍半萜二聚体类的化学成分及药理活性。
- 利用不同方法对研究植物不同部位进行提取、分离与纯化。
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初步对草珊瑚植物叶、茎、根等部位的提取液进行LC检测。
色谱柱Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18柱（250mmtimes;4.6mm，5mu;m）；流动相乙腈-甲醇（A）-0.5%甲酸水溶液（B）；流速：1ml/min；检测波长：344nm，柱温40℃；进样量：10 mu;L。 - 优化各项检测条件和参数
- 建立和优化HPLC条件与方法，对草珊瑚类植物的提取液所含成分进行近一步分析与研究。
- 采用体外实验的方法，在细胞水平上分别对不同部位及单体化合物进行抗炎活性综合评价。具体实施方案如下：
Ⅰ. 细胞活性实验：选择小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7细胞株，以MTT法测定加药后的细胞存活率，确定化合物的细胞毒浓度，选择在该浓度以下进行抗炎活性的筛选；
