- 研究意义
通过基因全合成来实现基因的分子改造和人工组建已经成为一种实验室常规手段，借助这一技术可以更有效地生产某些药物，也可以为某些疾病的诊疗提供方便。作为一名药学生，如果能够完全掌握并运用这一技术，将为以后的工作、生造提供良好的基础。
Htsa基因是GAS菌上的一段基因。A组链球菌( group A streptococcus，GAS)，是一种革兰氏阳性细菌，致病性强，可引起多种人类疾病，包括咽炎、猩红热、坏死性筋膜炎等，更为严重的是可能引起感染后的超敏反应性疾病如急性风湿热和肾小球肾炎等。GAS 在宿主体内生存和繁殖都必须有铁的参与，其中HtsA 参与的血红素摄取途径是GAS 摄取铁的主要途径之一。因此研究Htsa基因的人工合成并构建重组质粒有利于对GAS致病及诊疗的研究。
- 拟研究的问题
2.1对htsa基因进行分析，确定并分析结构中可能对基因合成造成影响的因素，如POLY结构、GC含量等。
2.2根据基因序列确定合成方案，制订整个合成流程。
2.3 PCR与酶切载体等步骤中各反应物量与反应条件的确定及影响。
PCR热循环过程各阶段温度的选取对其扩增结果的影响很大。其中退火温度的高低不仅决定着反应的特异性，也影响着反应的扩增效率。现有的研究表明：退火过程首先是引物和模板形成复合物，其次形成引物一模板一酶三倍体复合物，该过程伴随着化学键的不断生成和断裂。引起吸放热现象的产生。
3．拟采取的研究方案
3.1引物设计
从NCBI Genebank 的M1 GAS 全基因组序列( Genebank 登录号NC-002737) 中获取编码HtsA 的基因序列，根据基因序列设计合成所需引物，包括开始的PCR引物及后面的菌检引物、测序引物。
3.2 PCR反应
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