题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
课题背景:
细菌生物膜(Biofilm,BF)是细菌黏附于非生物或生物表面后将其包裹在自身分泌的多聚物中形成的一种具有立体结构的细胞群落。形成BF的细菌具有高度的耐药性并能逃避免疫系统的攻击,其感染易慢性化并难以控制,根据美国NIH的调查公告,80%以上的细菌性感染与BF有关,而铜绿假单胞菌是极为常见的BF感染相关病原菌。因此,铜绿假单胞菌BF感染的形成机制和防治方法已成为抗感染领域研究热点。
细菌生物膜与毒力侵袭因子是引起铜绿假单胞菌感染的两种重要的因素。本课题研究探讨抗生物膜和抗粘附活性的槲皮素毒力因子对铜绿假单胞菌的抑制作用,其目的是打击由生物膜介导的耐药性的出现。
实验流程:
1、测定最低抑菌浓度(MIC)
QCT抑制PAO1的最低浓度测定是依据采用临床标准和实验室标准协会。QCT的测试浓度范围从0.125到256mg/L。
2、结晶紫生物膜实验
此实验将探究QCT对生物膜形成的影响。PAO1细胞接种到在最初的浊度为0.05(OD600)的有或没有QCT的LB培养基上,37C培养为24小时。此后,用无菌磷酸盐缓冲剂盐水(PBS)将非粘附细菌冲洗掉,附着细菌用1%结晶紫染色液染色10分钟。PBS洗去除多余的染色。风干后,30%乙酸提取结合在生物膜上的结晶紫。结晶紫溶液的吸光度在OD590nm下测定。
3、共聚焦激光扫描显微
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