毕业设计开题报告
专业：药学（药理方向） 学号：1140702 姓名：廖红卫
一．目的及意义
酪氨酸酶抑制剂(TKI)的临床应用使得非小细胞肺癌患者的预后得到改善，而耐药性的产生则严重限制了TKI的长期效果，使得病情的复发较为普遍。阐明其耐药机制将对优化非小细胞癌患者的联合治疗方案提供支持。TKI耐受的非小细胞癌耐药机制的基因组学基础尚不清楚，本课题采用大规模随机基因敲除技术，在体外筛选对TKI产生耐药性的敲除细胞，并进行全基因测序，定位缺失基因，从而确定耐药相关基因，并进一步揭示完整的耐药机制。
二.研究背景
非小细胞肺癌(NSCLC)是是除小细胞肺癌以外的上皮细胞肺癌。相对于小细胞肺癌来说，NSCLC对化疗不敏感，病人预后较差。尤其是耐药性的产生，使得非小细胞癌的化学治疗更加困难。研究非小细胞癌细胞株的耐药性机制一直是非小细胞肺癌治疗领域的热点，EGFR,HER1/HER2，RAF，MET等信号通路作为常见耐药机制被研究的较为清楚。
EGFR（Epidermal Growth Factor Receptor）是上皮生长因子（EGF）细胞增殖和信号传导的受体信号传导的受体。EGFR属于ErbB受体家族的一种，该家族包括EGFR (ErbB-1),HER2/c-neu(ErbB-2),Her 3(ErbB-3) 和Her 4(ErbB-4)。EGFR也被称作HER1、ErbB1，突变或过表达一般会引发肿瘤。研究发现EGFR的高表达在对克唑替尼和色瑞替尼产生耐药性的ALK依赖型非小细胞肺癌患者中较为普遍，说明EGFR可能是ALK信号通路的旁路，从而增强细胞增殖和生存力,从而诱导耐药性。
MET蛋白是一种酪氨酸激酶受体，在与配体HGF结合后引起1234位和1235位酪氨酸残基的磷酸化从而完成活化，启动广泛的生理生化反应，总的来说就是侵袭性生长。在EGFR变异的非小细胞肺癌中，MET基因的扩增是其对格菲替尼和埃罗替尼敏感性下降的主要原因之一，在组织学检查中22%的患者有MET基因的高表达。采用MET抑制剂联合治疗，可恢复实验细胞株对格菲替尼和埃罗替尼的敏感性。而进一步研究表明，MET基因扩增可能在ERBB依赖型非小细胞肺癌中也能致使耐药性。
P2Y家族受体在非小细胞癌耐药性的产生过程中也有一定作用。研究表明虽然单独的P2Y基因扩增不足以产生明显的耐药性，但联合其他基因共同高表达时将显著降低实验细胞系对药物的敏感性。其机制是通过PKC家族的激活，从而促进癌细胞的生长，繁殖。P2Y受体尤其是P2Y1受体的激活，在ALK依赖型非小细胞肺癌细胞系H1322中的作用尤为明显，可降低此类患者对ALK抑制剂的敏感性。
