开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
组蛋白去甲基酶KDM6B促进结肠癌凋亡
【课题背景】
结肠癌是常见的发生于结肠部位的消化道恶性肿瘤,好发于直肠与乙状结肠交界处,以40~50岁年龄组发病率最高,男女之比为2~3:1。尽管在早期诊断方面取得了一些进展,但并发率和死亡率却在逐年上升,其发病率占胃肠道肿瘤的第3位。结肠癌可沿肠壁环行发展,沿肠管纵径上下蔓延或向肠壁深层浸润,除经淋巴管、血流转移和局部侵犯外,还可向腹腔内种植或沿缝线、切口面扩散转移。结肠癌发病的主要原因是高脂肪食谱和纤维素摄入不足。慢性结肠炎患者、结肠息肉患者、男性肥胖者等为易感人群。
组蛋白的转录后修饰是一种非常重要的表观遗传标志,而JMJD3可特异性地去除组蛋白第27位赖氨酸上的甲基,并可参与多种信号通路调控多种基因的表达,从而影响肿瘤的生长。已有研究报道,结肠癌中JMJD3表达异常,但JMJD3是否影响结肠癌的生长尚未可知。
【拟研究的问题】
本文旨在阐明组蛋白去甲基酶KDM6B/JMJD3对结肠癌生长的影响。首先培养结肠癌细胞,然后过表达或敲除细胞内JMJD3,观察并测定细胞凋亡、细胞周期、细胞活力、趋化性等的变化,以确定JMJD3是否可作为抑制结肠癌生长的靶点。
【采用的研究手段】
首先培养结肠癌细胞,待细胞状态稳定后铺板,并敲除或过表达细胞内JMJD3。通过Annexin V染色测细胞凋亡情况,通过流式细胞术测定细胞周期变化,通过CCK8实验测定细胞活力,通过PCR及Western实验测细胞中CCL2表达水平以反映细胞浸润性。此外,通过过表达或敲除实验,探索调控JMJD3的上游因子。
【文献综述】
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