开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
随着人们的生活水平的提高，饮食、生活和工作方式的改变以及目前人口老龄化的持续，使得心血管疾病在我国的发病数持续增多，已成为城乡居民疾病死亡的主因[1]，成为严重的公共卫生问题。据《中国心血管疾病预防现状蓝皮书2015》中总结，心血管疾病已成为全球范围内的死亡主因，我国患者人数已达2.9亿，疾病死亡率超过40%居所有疾病首位。在针对这一类慢性疾病的治疗预防中，他汀类药物扮演者极为重要的角色，凭借其良好的降血脂功效已成为全球范围内广泛运用于心脑血管的一级、二级预防中。
他汀类药物能竞争性的抑制肝脏中羟甲戊二酰辅酶A还原酶（HMG-COA），该酶是体内胆固醇合成的限速酶，被抑制后使甲基羟戊酸的合成减少从而导致内源性胆固醇的合成收到限制。同时药物还能增加肝细胞表面低密度脂蛋白受体数量，进而促进低密度脂蛋白的分解代谢[2]，降低血浆中低密度脂蛋白胆固醇的含量。此外他汀类药物的生物耐受性很好，这些都是导致其成为临床上应用于心血管疾病预防和治疗的一线药物。但正因为其被广泛的用于临床，特别是近几十年来，其产生的不良反应也不断出现被报道，引发了人们对于他汀类药物的安全性和合理应用的重视。
他汀类药物在临床上最常见的不良反应主要有三类即肌损害、肝脏损害和对中枢神经系统的损伤。关于肌损伤主要表现为肌痛、肌无力和肌酸激酶一过性的升高，大多数患者在3周～3月内能自行缓解改善甚至消失[3]。研究统计一般性的肌肉毒性副作用发生率在0.1%～1%间[4]，但也有严重的出现横纹肌溶解的不良反应，发生率在0.04%～0.2%之间[5]， 且都是剂量依赖性的。对于产生肌肉毒性的效应机制有很多，一种理论是可能药物引起细胞内氧化应激损伤，损害线粒体的功能破坏了肌细胞内钙离子稳态[6,7]。对于肝脏损伤实际上较为罕见，多为不可预测性的代谢异常导致，研究结果表明体内丙氨酸氨基转移酶水平升高大于三倍正常水平上限的发生率约为0.5%～2%，一般在用药后的三个月内出现，也是与剂量相关的副作用[8]。最后有关他汀类药物导致的中枢神经系统的损伤，其危害仍存在争议。早先认为患者用药除了会产生疲乏、头疼、头晕之外，还会产生认知损害和颅内出血的不良反应。尽管美国食品药品监督管理局(FDA)也推荐认为应“在他汀类药物说明书中补充有关可能出现一般性、不太严重的可逆的认识方面的副反应如记忆力减退” 。但一些深入的研究[9,10]却否定了有关认知损伤的不良反应对此提出了质疑，认为夸大了药物的危害,毕竟他汀类药物在心血管疾病中的广泛应用使患者得到的获益远大于药物伴随的风险[11]。
综合以上，本课题的目标在于研究一种他汀类药物的新制剂，以希望能够减少其对非靶向组织和部位的损害，同时考虑到主要的不良反应都是剂量相关的，也希望能减少药物使用剂量，最终达到提高药效和降低毒性的目的，而让他汀类药物的使用更加安全合理。初步的设计是选择他汀类药物中的代表药物阿托伐他汀，来制备一种阳离子脂质体制剂。脂质体至1965年Bangham[12]首次发现以来，凭借其良好的生物相容性和无免疫原性，以及能够被动靶向于网状内皮系统等诸多优点，被广泛用作药物制剂载体。脂质体作为外源性物质，其在体内的循环和分布受粒径影响很大，一般粒径在10～500范围内的都会受到内皮网状系统的吞噬作用[13,14]，药物包载于脂质体中借此可以更多的到达肝脏靶部位，既能减少给药剂量又有利于避免不良反应的发生。此外鉴于阳离子脂质体有更高的细胞亲和力，其由于高转染效率而被广泛用于基因药物的递送[15],本课题也拟将药物载于阳离子脂质体中，以期制备的制剂能实现更好的递送行为。接下来具体介绍一下本课题研究的内容和实验计划。
- 阳离子脂质体的制备和处方筛选；
本实验采用簿膜分散法制备脂质体，即现将磷脂、胆固醇和所用的正电性材料（十八醇-谷氨酸-组氨酸（SA2-Glu-His)溶于氯仿/甲醇混合溶剂中，再加入阿托伐他汀甲醇溶液后旋转蒸发除去溶剂，然后加纯水水合，最后探头超声得到脂质体溶液。用该方法制得脂质体粒径在100 nm左右且操作较为简便。处方筛选主要考察磷脂与胆固醇和正电性材料的比例，和超声频率这两个对脂质体稳定性和粒径形态影响较大的因素，以粒径、点位和包封率作为主要评价指标。
- 阳离子脂质体的细胞毒性考察；
采用经典的MTT法对肝实质细胞进行细胞毒性实验考察。MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo.(-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide，化学名为 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，是一种黄颜色的染料。MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。实验同时设置阿托伐他汀游离药物和阳性对照进行比较。
- 阳离子脂质体的药动学性质考察；
使用健康大鼠进行实验，得到制剂的药动学性质和参数。
- 考察阳离子脂质体的组织分布；
使用健康小鼠进行实验，对比普通阿托伐他汀游离药物，静脉注射考察其组织分布是否有显著差异。
参考文献:
