一、研究的背景及现状1.虫草类药材 虫草属[(冬虫夏草属)Cordyceps(Fr.)Link]属于子囊菌门(Ascomycaota)、子囊菌纲(Ascomycetes)、肉座菌目(Hypocreales)、麦角菌科(CvialciiPtaceae),广泛分布于世界各地[1] 。
中国虫草属种类广泛分布于中国的29省区,目前报道的已有400多种,其中有效名称有130个,包括了125种、3变种和2变型;有无性型报道的种有38个[2]。
真正的冬虫夏草资源稀缺,价格昂贵,市面上伪品太多,而且蛹虫草,虫草花之类的代用品也很多,鉴别它们十分困难。
2.植物甾醇的提取分离分析从植物油中发现谷甾醇等植物甾醇以来,人们对植物甾醇进行了广泛深人的研究,甾醇也被誉为生命的钥匙[3]。
植物甾醇在自然界主要以游离态或结合态存在,其中以结合态存在的有甾醇酯、甾醇糖苷、甾醇脂肪酸酯、甾醇咖啡酸酯等。
目前分离方法主要有:(1)利用个别甾醇蒸汽压力不同,真空蒸馏分段富积,但纯度较低;(2)在层析柱中利用个别甾醇在洗脱液与吸附剂之间分配差异,达到分离目的;(3)溶剂结晶法,利用个别甾醇在溶剂中溶解度差异,进行多级分步结晶,利用有机酸与甾醇羟基发生脂化反应生成相应衍生物,增大物理性质差异,然后重结晶分离[4]。
现在主要的检测方法有红外光谱法定性鉴定(IR),毛地黄皂苷法,iLebemrann一Bucrhadr比色法,薄层色谱法(TLC),高速逆流色谱法,高效液相色谱法(HPLC),气相色谱法(GC),质谱法MS和核磁共振法NMR。
其中iLebemrann一Bucrhadr比色法可以测定总甾醇或无甲基甾醇含量,较为实用但精确度不高;植物甾醇制品的定性鉴别可以选择薄层层析和红外光谱法,操作简便。
高效液相色谱法除灵敏度较低,气相色谱法除需要样品衍生化较麻烦之外,这两种分析技术比较成熟,快速可靠,可直接对植物甾醇进行定性和定量分析,适用于日常的分析检测工作,而高速逆流色谱法更适于制备性分离。
气相色谱-质谱串连技术GC-MS目前已广泛应用植物甾醇化学结构的分析鉴定[5]。
