流行性出血热病毒N蛋白的表达及纯化文献综述

 2023-02-12 20:35:29

开题报告内容:

一、课题解决的问题:

流行性出血热病毒(汉坦病毒)是引发流行性出血热(肾综合征出血热)的病原,分子生物学研究表明该病毒具有,三种结构蛋白,即G1糖蛋白,G2糖蛋白,和核衣壳蛋白。本课题将对该病毒免疫学上最重要的结构蛋白,N蛋白(核衣壳蛋白或称NP),进行在原核表达系统中的表达以及表达产物的纯化与免疫学鉴定。

二、研究方法和技术路线:

本课题是在蛋白质序列分析的基础之上,在确定核衣壳蛋白的氨基酸序列,设计DNA序列,通过基因重组技术和组氨酸标签融合表达系统建立了核衣壳蛋白融合蛋白的重组表达载体,经由大肠杆菌作为工程菌进行培养。将重组质粒转化进入大肠杆菌后接种至LB液体培养基,后经扩大培养,IPTG诱导蛋白质表达,获得高效表达的融合蛋白,在完成粗提取步骤之后,利用GST亲和层析蛋白纯化技术进行提纯。纯化后的融合蛋白作为免疫原免疫小鼠得到抗血清,并应用酶联免疫吸附试验进行抗原性和免疫原性的检验。

三、论文课题研究进度安排:

2017年3月10日----3月19日 确定选题,查阅中外文文献,访问NCBI等网站获取序列相关信息。

2017年3月20日----3月22日 构建实验思路,撰写开题报告。

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