VE对高糖刺激下HUVEC内NLRP3炎性体表达的影响
【研究的主要目的和意义】
高血压（Hypertension）是持续血压过高的疾病，是一种以动脉压升高为特征，可伴有心脏、血管、脑和肾脏等器官功能性或器质性改变的全身性疾病，它有原发性高血压和继发性高血压之分。其发病机制迄今尚未完全阐明。
内皮细胞功能紊乱是包括高血压在内的很多心血管疾病发生的始动环节。血管内皮细胞通过产生大量强效血管活性物质，包括血管舒张因子NO和收缩因子内皮素ET-1，对心血管功能的调节起着关键性的作用。另外血小板活化因子，黏连因子等具有部分与ET相似的作用。这些物质作用的多面性和它们之间的相互作用，形成了对血管舒缩功能与血液流动性错综复杂的调节系统。
炎性小体是大分子质量的多蛋白复合体，作为固有免疫的一部分，炎性小体通过模式识别受体（PRR）识别病原微生物及内源性危险信号，招募并激活caspase-1，剪切IL-1beta;和IL-18前体，产生相应的成熟细胞因子，参与机体对病原体的清除及适应性免疫应答的产生。其中NLRP3炎性小体能够识别多种类型的病原体及危险分子，是目前研究最多的炎性小体[2]。
NLRP3炎性小体由NLRP3，凋亡相关斑点样蛋白以及pro-caspase-1组成。目前提出的NLRP3炎性小体激活途径主要有三种：（1）钾离子外流，刺激物诱发细胞释放ATP引起胞内钾离子外流，随后招募泛连接蛋白pannexin-1介导开放跨膜通道，使相应配体进入细胞内激活NLRP3炎性小体。（2）溶酶体破坏，晶体或颗粒物质通过内吞作用进入细胞，降低吞噬溶酶体膜稳定性，引起溶酶体蛋白水解酶的释放，从而激活NLRP3炎性小体。（3）线粒体活性氧（reactive oxygen species，ROS）生成，包括线粒体活性氧和NADPH氧化酶来源的活性氧。目前关于ROS激活NLRP3炎性小体的机制尚不明确，可能与一种能够与硫氧还蛋白（thioredoxin，TRX）相互作用的蛋白（thioredoxin interacting protein，TXNIP）有关[2]。
已有研究发现，NLRP3炎性体在高盐诱导的高血压[5]、肾素依赖的高血压等高血压中均有参与[6]，抑制或敲除NLRP3可以改善血压高的症状。也有研究证明人脐静脉内皮细胞在某些刺激下使NLRP3炎性体激活[7]。所以我们假设高葡萄糖诱导的内皮功能紊乱(ET-1增多，NO减少)可能部分由于NLRP3表达升高引起。
高血糖可以通过多种途径损伤血管内皮细胞功能，目前研究主要集中在几个方面：（1）炎症因子，如上调粘附分子ICAM-1、VCAM-1的表达，抑制基质金属蛋白酶类的表达，下调脂联素受体表达等；（2）氧化应激；（3）蛋白质非酶糖基化过程增强；（4）继发性脂代谢紊乱；（5）PKC活化；等等。氧化应激是指机体在遭受各种有害刺激时,体内高活性分子如活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)和活性氮自由基(reactive nitrogen species,RNS)产生过多,氧化程度超出氧化物的清除,氧化系统和抗氧化系统失衡,从而导致组织损伤。
机体存在两类抗氧化系统,一类是酶抗氧化系统,包括超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等;另一类是非酶抗氧化系统,包括维生素C、维生素E、谷胱甘肽、褪黑素、alpha;-硫辛酸、类胡萝卜素、微量元素铜、锌、硒(Se)等[1]。其中维生素E（生育酚）是最具有代表性的定位于膜的脂溶性天然抗氧化剂，在大多数情况下，维生素E的抗氧化作用是脂氧自由基或脂过氧自由基反应，向它们提供氢离子，使脂质过氧化链式反应中断。维生素E在体内外都具有强大的抗氧化作用，其抗氧化作用不仅有剂量依存关系，而且与不饱和脂肪酸的量和促化因子（如活性氧，铁）的量有关[3]。有研究发现维生素E呈剂量依赖性的抑制oxLDL诱导的细胞生存率显著降低，NADPH氧化酶亚基mRNA的表达明显上调以及ROS的产生大量增加，提示维生素E可通过抑制NADPH氧化酶的表达从而抑制ROS的产生，起到保护内皮细胞的作用[1]。
