开题报告内容:
- 课题的研究背景、意义和目的
类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种慢性、系统性、非感染性的自身免疫性疾病,以关节慢性滑膜炎症、关节进行性破坏为主要临床特征,最终导致不同程度的骨和软骨侵蚀,成为困扰临床医生和患者的难题。RA发病机制迄今仍无定论,然可从免疫紊乱、环境因素和遗传易感因素进行研究。国内外研究发现,多种细胞因子、微RNA(microRNAs,miRNA)及信号转导通路在滑膜和骨质破坏过程中发挥作用。
TNF-alpha;是炎症级联反应的核心,在RA的发生和发展过程中起着重要作用。在RA中,TNF-alpha;诱导的炎症主要通过NF-kappa;B和MAPK等信号转导通路发生。除此之外,TNF-alpha;是否通过其他信号转导通路诱发并影响RA的发生和发展是值得探索的问题。Hippo信号通路是21世纪初利用果蝇遗传学研究发现并命名的,其在调控细胞增殖凋亡、决定器官大小、维持组织稳态等方面发挥关键作用。然而,Hippo信号通路在RA中的作用机制尚不清楚。所以本课题通过免疫印迹法,检测经TNF-alpha;诱导后类风湿性关节炎成纤维滑膜细胞中Hippo信号通路的改变来验证Hippo信号通路是否参与了RA的发生和发展,从而探讨类风湿性关节炎的新的可能的发病机制,为治疗类风湿性关节炎提供新的思路和实验依据。
二、课题研究的主要内容
1.Q-PCR检测加TNF-alpha;刺激和不加TNF-alpha;刺激类风湿性关节炎成纤维滑膜细胞中Hippo信号通路中分子mRNA水平是否改变。
2.WB检测经TNF-alpha;刺激后类风湿性关节炎成纤维滑膜细胞Hippo信号通路是否改变以及如何改变。
三、研究难点
1. Q-PCR仪的使用及数据的处理
2. 免疫印迹的实验操作及数据的处理
四、进度安排
