开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
抗肿瘤药物在肿瘤细胞中的体外药效检测
背景：【1】2018年9月12日，全球知名神刊《CA: A Cancer Journal for Clinicians》发表了最新的全球癌症统计数据，基于IARC（国际癌症研究机构）制定的关于癌症发生及死亡的GLOBOCAN2018评价标准，该文章提供了一份关于全球癌症负担现状报告，重点关注了20个具有地理差别的世界区域。预计2018年全球将新增1810万癌症病例，另有970万癌症患者死亡。到本世纪末，癌症将成为全球头号“杀手”，也是阻碍人类预期寿命延长的最大障碍。这些隐形杀手当中肺癌位于首位，紧接着是乳腺癌，结肠癌，前列腺癌和胃癌。并据世界卫生组织统计癌症是70岁以前死亡人群的主要原因。新增1810万癌症病例中，亚洲占据近一半。当然，这主要是由于近60%人群居住在亚洲。其中男性主要是前列腺癌而女性则是乳腺癌。其中约45%的肿瘤可以被治愈，约18%的癌症可以通过放疗达到根治。
拟研究或解决的问题：然而尽管如此癌症相关药物及相关技术的创新开发显得迫切重要。在这过程当中药物药效检测是开发一种药物用于临床之前的最为关键的一步。从而各药物开发研究机构注入大量人力财力与此上。因此本次论文课题从抗肿瘤药物在肿瘤细胞中的体外药效检测入手，利用其可实现物种特异性，用更简单，方便等特点，对体外药效检测做一个科普性的研究，用几种已上市的或公司客户提供的待测定其药效的肿瘤药物检测其IC50值。在此次课题研究中通过佐证受试药物体外抑制肿瘤细胞增殖的有效浓度，为新药物的研发提供体外实验依据。
采用的研究手段：本实验中利用中美冠科生物技术（太仓）有限公司的细胞库中的肿瘤细胞为受试细胞，以公司客户提供的测试药物或本公司购买的已上市的商品药物为药物来源，用CellTiter-Gloreg;(CTG)在体外测定抗癌药物对癌细胞的抑制作用，测定药物的IC50值（the half maximal inhibitory concentration），IC50值可以用来衡量药物诱导凋亡的能力，即诱导能力越强，该数值越低。从而确定抗癌药物对于癌细胞是否具有抑制作用。在此过程当中中美管科生物技术（太仓）有限公司提供相关的科研场所及设备仪器耗材，并配备了优秀的指导老师指导课题的顺利进行。
CellTiter-Gloreg;(CTG)即ATP生物发光发作为药物药效检测可行性并被广泛应用的方法，被广大医药研究机构所接受。其具有灵敏底高，检测时间短，简单并可靠的药效检测实验方法，值得被进一步的研究和推广。将 A TP生物发光法应用于临床前肿瘤药物敏感性的筛查，对肿瘤药物的开发具有不可替代的意义。
基本内容：
本研究在5种以上癌症细胞中测试5中以上癌症药物的体外药效结果IC50值。那么何为ATP生物发光发呢，其具有怎样的原理呢？
ATP生物发光法是 80年代后期建立起来的一 种“超敏感”的实验方法。其基本原理是: 活细胞中存在ATP，萤光素酶反应依赖活细胞中的ATP CellTiter-Gloreg;检测试剂含有Ultra-Glotrade; 重组萤光素酶及荧光素，可直接加入培养细胞检测。 检测试剂可自动裂解细胞，以使活细胞中的ATP释放出来，并可保护ATP，防止降解。活细胞中的ATP参与萤光素酶反应，反应产生的光正比于微组织中的活细胞数量。将不同数量的细胞接种在96-孔悬滴培养板，培养几天后，在微组织培养孔中，加入与培养基等体积的CellTiter-Gloreg; 检测试剂，震荡混匀10分钟后，室温孵育10分钟，后用读板仪测细胞数量，得出数据用于下一步的分析。
目前ATP生物发光法在喷气燃料中生物监测，快速检测电子烟雾化液菌落总数，在油田采出水中的应用，在乳品中的微生物的快速检测等方便大量应用。在肿瘤药物筛选是目前大热趋势，因此ATP生物发光法的进一步的应用会给药物筛选提供更好的平台。
