开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
文献综述：
- 动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是指在动脉及其分支的动脉壁内膜及内膜下有脂质沉着(主要是胆固醇及胆固醇脂),同时伴有中层平滑肌细胞移行至内膜下增生,使内膜增厚,形成黄色或灰黄色状如粥样物质的斑块。 AS是危害人类健康的主要疾病之一,其对心脑血管的损害可累及全身的各个器官,已成为多种中老年常见病的基础病变。AS最常累及心、脑、肾,且与糖尿病、高血压等疾病高度相关。AS是多种脑血管事件的病理基础,与颅内动脉瘤、慢性缺血性脑病的发生发展关系密切。脑部血管状况也一定程度的影响着颅脑手术的成功及术后恢复。 动脉粥样硬化经历以下几个阶段。forall;期:首先在动脉内膜出现略为隆起的含有脂质小滴的结缔组织所形成的黄色条纹。#期:由于脂质(磷脂、脂蛋白、胆固醇)的不断沉积,条纹增大,变软形成斑块。exist;期:斑块表面纤维变化,呈灰色或珍珠白色,内部隆起的内膜增厚,而内部的蛋白质常常含有胆固醇结晶,斑块发展进入中层。%期:斑块表面坏变脱落,形成 粥样硬化溃疡,有钙盐沉着及血栓形成,导致血管阻塞,机体器官缺血,发生功能障碍。
- 动脉壁内皮损伤及脂质的沉积是目前公认的AS 始动因素[2] ,其基本过程如下:血管内皮细胞受某些因素如:高血压、高脂血症等的刺激发生损伤后,发生功能改变和渗透性增高。血液中的脂质在内皮下沉积。随后单核细胞黏附在内皮细胞损伤处进入内皮下,吞噬脂质成为泡沫细胞,形成脂肪斑。血小板也逐渐聚集并黏附于内皮的损伤处。吞噬细胞、内皮细胞及黏附于内皮细胞损伤处的血小板释放生长因子刺激平滑肌细胞进入内膜,增生并合成胶原纤维,脂肪斑演变成纤维斑块。此时脂质进一步沉积,沉积的脂质进一步加重吞噬细胞的黏附、血小板的聚集和炎性反应因子的释放。随着这一过程的发展,脂质不断沉积,多种炎性细胞逐渐浸润,纤维帽渐渐变薄,慢慢演变为不稳定斑块。以不稳定斑块的裂缝、糜烂或破裂为基础形成 血栓,最终导致严重心脑血管损害。
- 过量胆固醇从肝外组织中的清除是预防和治疗AS的关键步骤。ATP结合盒转运体A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)是ATP结合盒转运体超家族成员之一,是一种重要的以ATP为能源转运各种离子、脂类等细胞代谢物的膜转运蛋白。ABCA1可介导细胞内磷脂和游离胆固醇转运至贫脂或无脂的载脂蛋白A-I(apolipoprotein A-I,apoA-I),从而促进高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)生成,启动胆固醇逆转运过程,在机体清除多余脂质的过程中发挥重要作用。ABCA1基因突变可导致严重的HDL缺乏综合症-Tangier Disease(TD),患者以血浆HDL及apoA-I严重缺乏和组织巨噬细胞内胆固醇酯增多为主要特征,常伴有高胆固醇血症、心血管疾病和AS。对转基因小鼠的研究表明ABCA1过度表达使apoA-I介导的胆固醇流出明显增加,血浆HDL水平显著升高,而且ABCA1蛋白水平与胆固醇流出增加及HDL水平升高明显相关。因此,以ABCA1为靶点筛选得到其表达上调剂,不仅将加深我们对真核生物ABCA1基因表达调控及其生物学意义的理解,揭示胆固醇逆转运调控关键环节,而且对新型抗动脉粥样硬化药物的开发也具有指导意义。
- 动脉粥样硬化 (atherosclerosis, AS) 是一种慢性动脉疾病, 可引起冠心病和脑梗死等, 是严重危害人类健康的常见病、多发病 [1] 。在发达国家动脉粥样硬化性心血管疾病被称为“头号杀手”。建立一种脂质代谢与人类相似的实验性动脉粥样硬化整体动物模型, 并采用新的研究手段对该疾病进行研究具有十分重要的意义。目前国内研究动脉粥样硬化使用最多的实验动物是家兔和大鼠。家兔是喂饲富含高胆固醇食物引起高脂血症和 AS 病变的敏感动物, 高脂模型极易形成, 很快发展成动脉粥样硬化。但其病变部位与人类不同且血清中超低密度脂蛋白占总胆固醇的比例过高。另外家兔为草食动物, 其脂代谢与人差异较大。家兔以 beta;-VLDL 为主要的致病脂蛋白, 不经氧化修饰就可被巨噬细胞大量吞噬, 不同于人体内LDL 的致病作用。在国外高血脂研究中, 大鼠的使用呈逐渐减少的趋势, 因为大鼠血清中高密度脂蛋白(HDL) 是血浆胆固醇的主要载体, 且大鼠具有对抗AS 形成的能力。而金黄地鼠在胆固醇合成、代谢方面, 受体、非受体转运途径的比例与人类较为相近,对食物中脂质和调节血脂功效成分的反应更接近于人, 又具成本较低、造模时间较短的优点, 因此目前国际上在血脂代谢的研究中趋向于采用金黄地鼠来建立高脂血症和 AS 模型 。
- 近年来心血管疾病(Cardiovascular disease,CAD)已成为人类疾病死亡的主要原因。动脉粥样硬化(Atherosclerosis,As)在其发生发展过程中,是一个很重要的独立病理基础,是脂质在大动脉积累所引起的脂质代谢异常和炎症反应。大量的基础研究和临床试验发现,高密度脂蛋白(HDL)及载脂蛋白A-I(ApoliproteinA-I,apoA-I)有直接的抗动脉粥样硬化作用,这主要归功于HDL和apoA-I的刺激巨噬细胞胆固醇流出和保护内皮细胞的功能。因此,以HDL/apoA-I为干预靶点,特异性提高血浆中HDL浓度以及抗As能力,是一种目前治疗As的很好策略,为心血管疾病的防治拓展了方向。
- 近 年 来，叙 利 亚 金 黄 地 鼠 ( Syrian GoldenHamster)已被广泛用于肝脂代谢的研究中。由于金黄地鼠的脂蛋白代谢与人类非常相似，且对高脂饮食刺激具有较高敏感性，短时间内即可形血脂紊乱和非酒精性脂肪肝，因此作为血脂紊乱模型用于调脂化合物的药效学研究。由于金黄地鼠作为实验模型进行脂代谢研究有明显优势，因而受到很多研究者的关注 。
- 与人肝癌细胞系 HepG2 细胞相比，金黄地鼠肝脏细胞产生的包括血清载脂蛋白 B 在内的脂蛋白与人类低密度脂蛋白(VLDL)密度相似 。该类蛋白是血浆内胆固醇的主要载体。早在 1982 年，Carol J． Maslansky 与 Gary M． Willams 就使用金黄地鼠 原 代 肝 细 胞 对 细 胞 色 素 P 450 ( cytochromeP450)进行了研究。随后地鼠原代肝脏细胞相继被用于油酸、棕榈酸及硬脂酸的代谢速率、环一磷酸腺苷(cAMP) 类似物对细胞内胆固醇代谢的响以及酒精对细胞内细胞色素 P4502E1 蛋白稳定性的影响等研究。综上所述，该细胞是体外研究有关脂类代谢机制的重要模型，但有关该细胞分离与培养还未见详细报道。
研究方法及研究目的：
通过提取高脂饮食的不同组别金黄地鼠肝脏组织内RNA，并进行反转定量的方法，探寻在小分子化合物IMB5012对于金黄地鼠肝脏基因表达的影响，进而佐证其体内作用与作用机制。
研究计划：
2月26日至4月30日：主要实验与数据处理。
5月4日至5月20日：论文写作与修改。
5月20日至实习结束：答辩
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