原癌蛋白SET的亚细胞定位信号肽的鉴定及其突变对神经细胞生长的影响课题性质 radic;基础研究应用课题 设计型 调研综述 理论研究课题的目的:对原癌蛋白SET基因中核定位信号部分进行删除突变,转化感受态大肠杆菌并涂板,利用氨苄抗性筛选阳性克隆子。
转染细胞并观察SET的亚细胞定位以及核定位信号缺失与否对神经细胞生长的影响。
研究内容:突变原癌蛋白SET基因中与定位相关部分,研究其突变对神经细胞生长的影响。
进度安排:第一~二周:查阅文献,确定课题,撰写开题报告,准备实验材料。
第三~五周:对SET基因进行删除核定位信号和第十一位丝氨酸的突变,转化DH5alpha;,抗生素筛选目的质粒,测序验证后大量培养并提取目的质粒。
第六~七周:构建慢病毒质粒载体并转染293T细胞,纯化后测定滴度。
第八~十一周:转染神经细胞,鉴定其亚细胞定位及对神经细胞生长的影响。
第十二周:完成论文。
论文综述:SET蛋白又被称为蛋白磷酸酶抑制剂2(I2PP2A),模板活化因子(TAF-I)。
它是一种多功能的蛋白,它参与DNA复制与转录、核小体的组装与拆装、染色体修饰、组蛋白乙酰化、细胞周期、神经元凋亡等生物学过程的调节。
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