1.选题目的意义及国内外进展
1.1研究目的
表皮生长因子（Epidermal growth factor简称EGF）是Cohen.S于1962年在研究神经生长因子时发现的，最初发现该因子具有促使新生儿睁眼及萌芽的作用，Cohen等两位科学家也因对EGF的发现及研究作出巨大贡献被授予1986年诺贝尔医学和生理学奖。1975年从人尿中提取表皮生长因子（human EGF简称hEGF），由于其可抑制胃酸分泌，又称为抑胃素。
人表皮生长因子是一种由53个氨基酸构成的多肽，等电点（PI）为4.6，分子量为6045Da，含有3个链内二硫键[1]，活性中心位于48-53个氨基酸残基之间。人EGF(hEGF)最早从尿中获得，其生物学活性、理化特性及氨基酸序列都与EGF极其相似，尽管二者氨基酸序列有所不同(二者氨基酸组成有70%的同源性)，但都能与EGF受体结合，虽然二者结合位点相同,但抗原位点不同[2]。
人表皮生长因子具有多种生物学活性，可促进皮肤和角膜的修复，调控肿瘤细胞的合成，保护应激性溃疡等[3]。由于表皮生长因子具有的多种生物学活性，故其被广泛用于临床治疗各种疾病，如：治疗消化道溃疡及口腔溃疡，促进创面愈合，抗肿瘤等。EGF 的临床应用有着广泛前景，其相关基础及临床研究也得到了极大地重视。
在重组人表皮生长因子基因工程菌摇瓶发酵工艺的基础上，在50L发酵罐中研究重组人表皮生长因子基因工程菌的发酵培养条件及诱导条件，确定了发酵培养的最适培养温度、罐压、风量、溶氧量、甘氨酸浓度、最适诱导温度以及发酵时间等发酵工艺参数。
1.2研究意义
为了提高微生物发酵效率，在工业生产中一般使用发酵罐进行微生物发酵。工业生产的发酵罐容量一般在300L-15000L不等。在真正实现工业化大规模生产前需要在实验室规模对发酵罐条件进行初步摸索。实验室级别的发酵罐容量一般在50L以下，与摇瓶相比，发酵罐发酵需要更为严格的发酵条件，发酵过程中各项参数需要精确控制。影响发酵罐生产产量的因素很多，如溶氧、pH、温度、添加剂和发酵时间等。本实验在上述摇瓶优化的基础上，探究了最适培养温度、罐压、风量、溶氧量、甘氨酸浓度、最适诱导温度以及发酵时间等发酵工艺参数对于发酵罐生产重组人表皮生长因子产量的影响，为实现重组人表皮生长因子的工业化放大生产奠定了坚实的基础。
1.3国内外研究现状
目前，在中国国内生产重组EGF的企业主要有三家。一是上海昊海生物科技有限公司，其与中国科学院上海生化研究所甘仁宝等合作开发的表皮生长因子主要为康合素系列，使用大肠杆菌进行原核分泌表达。二是桂林华诺威基因药业有限公司，其与中国医学科学院基础医学研究所黄秉仁等合作开发的易孚系列，使用毕赤酵母表达系统进行真核分泌表达。三是深圳华生元基因工程发展有限公司，其与暨南大学涂桂洪等合作开发的金因舒系列产品，使用大肠杆菌进行原核胞内表达。目前EGF生产成本高，单位售价贵，限制了EGF的使用和研究。
