选题目的:在药典方法的基础上,对辛酸钠含量测定方法进行改进,并对新的检验方法进行恰当的方法学验证,建立一种准确性高,简单快捷的方法,对人血白蛋白成品的辛酸钠含量进行质量控制。
研究现状:药典方法采用气相色谱法。样品前处理耗时长,溶剂使用量小,误差大,重现性不佳。通过文献查阅,现已有萃取法,柱前衍生-反相高效液相色谱法,离子排斥色谱法等改进方法。
1.萃取法利用辛酸钠为有机弱酸强碱盐的化学性质,及在两种溶剂中分配系数不同,分离出辛酸,再用酸碱滴定测定其含量。
实验方案:将19ml纯化水加入到250ml的分液漏斗中,准确加入浓度约20%的白蛋白溶液 1 ml(V1), 然后加入 1 mol/L盐酸溶液 0.2 ml, 摇匀后加入 15 ml乙醚及 1 ml正丁 醇, 震振荡 15s, 静置分层后, 弃掉下部水层, 然后将醚层用 15 ml纯化水震振荡洗涤 2次, 分层后将醚层转入到 100 ml的 锥形瓶中。 再用 15 ml混合溶解液置前述分液漏斗中, 轻轻 摇荡充分洗涤分液漏斗内壁后, 将混合溶解液合并转入前述 锥形瓶中, 混匀, 加入 1%酚酞指示液 2 ~ 3滴, 然后用标准氢 氧化钠滴定液(0.01 mol/L)(N)滴定至淡粉红色即终点, 记 录消耗体积数(V)。 同时用纯化水 1 ml同法操作所得的萃 取液消耗标准氢氧化钠滴定液(0.01 mol/L)(N)数作空白(V)。
计算公式:辛酸钠含量(mmol· g-1· Pr)=(V-V0)· N /(c·V1)
2.柱前衍生-反相高效液相色谱法以omega;-溴苯乙酮为衍生试剂,将辛酸钠衍生后用反相高效液相色谱法测定其含量的分析方法。
实验方案:
①溶液的制备:
对照品溶液:准确称取 41. 6 mg 辛酸对照品于 10 mL 容 量瓶中,加水超声溶解,摇匀定容,即得对照品贮备溶液。临用时逐级稀释,配制成系列浓度对照品溶液。
内标溶液:准确称取9. 40mg 庚酸,加水溶解并定容至 10 mL,得内标贮备液,浓度为0.00720 mol /L。准确量取贮备液5 mL,稀释至 10 mL,得内标溶液。
